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病原微生物实验室消毒灭菌沈 伟 内 容 基本概念 常用消毒和灭菌方法 病原微生物实验室消毒和灭菌制度 病原微生物实验室消毒和灭菌原则 不同设备与物品的消毒方法 消毒灭菌操作与效果监测 一、基本概念 消毒（disinfection） 杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理。（不一定杀灭芽孢） 灭菌（sterilization） 杀灭或清除传播媒介上所有微生物的处理。（包括芽孢） 一、基本概念 消毒剂（disinfectant） 用于杀灭微生物使其达消毒或灭菌要求的化学制剂，但不一定杀灭孢子。 消毒剂常用于非生命物体或其表面。 灭菌剂（sterilant） 可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其达到灭菌要求的化学制剂。 一、基本概念 有效氯（available chlorine） 有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量(非指消毒剂所含氯量)，其含量用mg/L或%浓度表示。 有效碘、有效溴 定义和表示法与有效氯对应。 消毒剂的分类 高效（水平）消毒剂：杀灭所有微生物，除了 大量细菌芽孢。 中效：杀灭除了细菌芽孢以外的所有微生物， 包括分支杆菌与亲水病毒。 低效：杀灭多数细菌繁殖体和亲脂性病毒。 消毒和灭菌是保护人员和环境不被病原微生物感染和污染的重要环节 含有病原微生物的废物必须经过消毒或灭菌才能作为普通废物处理； 对操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过消毒达到对病原微生物的杀灭，对操作人员进行保护,对环境保护。 消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是至关重要的。 消毒和灭菌的基本原则 及时,彻底,有效,预清洁,避免二次污染,减少对人/物品/环境的损害  清除污染的特殊要求，应根据实验工作类型以及所操作的感染性物质的特性来决定。 本章所提供的一般性资料，可用于各个病原微生物实验室建立标准和操作程序，以处理特定实验室中所涉及的生物危害。  消毒与灭菌的方法 化学消毒灭菌 通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢。 消毒对象：物体表面、空气、污染物品等。 消毒方式：擦洗、熏蒸、浸泡等。 物理消毒灭菌 包括压力蒸汽、紫外线、焚烧、HEPA过滤除菌等。 清洁的作用 清洁（cleaning）：指去除污垢、有机物和污渍。 方法包括刷、吸、干擦、洗涤或擦洗。 严重污染的物品能影响杀菌作用，许多杀菌剂只 对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。 是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定。 预清洁时必须小心，以避免暴露于感染性物质。 预清洁时必须用与随后使用的杀菌剂相容的物质。通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。 防止过度使用消毒剂! 正确使用化学消毒剂可以确保实验场所的安全，减少来自感染性物质的危险。 应考虑经济、库存控制以及限制环境污染等因素，尽可能减少化学消毒剂的使用量。 化学消毒剂的作用时间因品种和厂商而异，应按产品说明书配制和使用。 二、常用消毒和灭菌方法 常用化学消毒灭菌剂的性能比较 常用化学消毒灭菌剂的安全性 1、压力蒸汽灭菌 是最可靠、首选的消毒灭菌方法。 适用范围：耐湿热物品的消毒或灭菌。 常见类型： - 下排气式压力蒸汽灭菌器：121℃作用20-30min - 预真空与脉动真空压力蒸汽灭菌器: 134℃作用4min 注意事项：资质、装载、防护、监测、维护。 1、压力蒸汽灭菌 2、紫外线消毒 可达高水平消毒，使用方便；但由于对人皮肤黏膜有刺激作用，并产生臭氧，在有人情况下使用受到限制。 适用范围：室内空气消毒、 能直接照射到的光滑物体表面的消毒。 常见类型：①普通直管型；②高强度紫外线灯； ③低臭氧紫外线灯；④高臭氧紫外线消毒灯。 注意事项：安装数量、强度监测、防护措施等。 3、高效过滤除菌 高效过滤除菌技术，对空气中≤0.3μm颗粒与微生物的阻留率能达到99.97 %以上。 适用范围：主要用于生物安全柜与生物安全实验室的空气净化除菌。 注意事项： * 必须定期更换高效过滤器（HEPA）， * 更换前应先用甲醛或过氧乙酸进行熏蒸消毒， * 更换时严格做好工作人员防护； * 换下的过滤装置装入密封袋内由具有资质的 单位焚烧处理。 HEPA滤膜 4、含氯消毒剂 常用含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯、三氯等 常用剂型：粉剂、片剂、液体 杀菌能力：高水平消毒；1000-5000mg/L浓度。 适用范围：饮用水、餐饮具、果蔬、环境、 物表、污水、污物、排泄物、分