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完成实验.ppt
完成实验 提出问题 作出假设 设计实验 分析结果,得出结论 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 该探究活动中涉及4个科学方法: (1)数学模型法; (2)抽样检测法; (3)显微观察法; (4)微生物培养法。 酵母菌的计数 (1)计数工具——血球计数板 实物图 正面图 侧面图 计数室 滴液处 酵母菌的计数 (1)计数工具——血球计数板 放大后的计数池 每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格,其中中央的即为计数室,每个计数室的体积为0.1mm3 。 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25X16 = 400小格 16X25 = 400小格 每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3 * * * * * * * * * 抽样检测: 5×16=80个小格 抽样检测: 4×25=100个小格 酵母菌的计数 (2)计算: 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少? 酵母细胞个数/mL= 所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数 所数的小方格数 例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.1mm3 ,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先??????? 后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有????????? 个。 例2 :在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌 ?? ?? 个。 2x107 2×108 稀释 例3? 检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻?? 个/mL。 5n×105? 酵母菌的计数 (3)计数的操作 稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓,可不必稀释。 镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检, 若有污物,则需清洗后才能进行计数。 加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙自行渗入计数室。 注意不可有气泡产生。 酵母菌的计数 (3)计数的操作 显微计数:静止5分钟后,先用低倍镜(16×10)找 到计数室所在的位置。然后根据血球计数 板规格,每个计数室选取5个(或4个)中 方格中的菌体进行计数。每个小方格内约 有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线 上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。如 要从两个计数室中计得的值来计算样品的 含菌量。 酵母菌的计数 (4)血球计数板的清洗: 使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。 酵母菌的计数 (5)注意事项: 进行计数前,应先将试管摇匀,目的是使酵母菌在培养液中混合均匀,以减少计数误差。 显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应取相邻两边及顶角计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可将培养液稀释一定倍数后再计数。 本实验无对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。 血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗的方法清洗。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数 (6)讨论:计数前还应有哪些步骤?需注意些什么? 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌培养: 培养液配制 灭菌 接种 培养 配制质量分数为5%的葡萄糖溶液(葡萄糖20g,1000 mL水),分装到5个烧杯中(200mL/烧杯) 用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。 接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每个烧杯中加入。(注意:滴加量不要太多,避免初始菌数过多。) 将烧杯置于28℃的恒温箱中培养 无菌 操作 结果分析 (1)数据
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