我国蔬菜育种水平与育种技术变化20121023(广电).ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2. MAS育种方法 正向选择——前景选择 反向选择——背景选择 A B F1 F2 亲本A 亲本B X F1 自交 F2 …… 电泳条带 * 3. 提高分子标记的筛选效率 (1) 多重PCR方法 (2) 用相斥相分子标记进行育种选择 (3) 克服连锁累赘 (4) 降低MAS育种的成本 * （1）可以清除同一座位不同等位基因间或不同座位间互作的干扰，消除环境的影响； （3）可有效地对表型鉴定十分困难的性状进行鉴定； （6）加速回交育种进程，克服不良性状连锁，有利于导入远缘优良基因。 （5）可同时对多个性状进行选择，开展聚合育种，快速完成对多个性状的同时改良； （4）共显性标记可区分纯合体和杂合体，不需下代再鉴定； （2）在幼苗阶段就可以对在成熟期表达的性状进行鉴定，如果实性状、雄性不育等； 4. 分子标记辅助选择的优点 * （七）品种纯度鉴定 利用分子标记技术进行园艺植物品种纯度鉴定，不受环境、取材部位、时间等条件的限制,其检测位点遍及整个基因组,多态性高、准确、快速、信息量大，可以区分出形态标记难以鉴别的细微差别。 * （八）遗传稳定性检测 * 1. 质量性状基因的定位 质量性状定义：在分离群体中表现为不连续性变异、能够明确分组的性状。 数量性状定义：在分离群体中表现为连续性变异不能够明确分组的性状。 数量性状基因座(quantitative trait loci, QTL)作图：确定数量性状位点基因与分子标记间的连锁关系。 分子标记辅助选择和聚合育种！ 甜瓜雌性系MAS 获得雌性株的思路： 二对基因遗传观点： A、a：A—两性花植株上产生雌花的基因，a 是不产生雌花的等位基因。AA和Aa的个体上有雌花形成，而aa 上只产生两性花。（对G上位） G、g：G两性花植株上产生雄花的基因，g是不产生雄花的等为基因。GG和Gg基因型植株上有雄花形成，而gg基因型植株上则仅有两性花。 A-G- ：三型花株或雌雄异花同株（AAGG） AAgg: 雌性株；（如何得到A、g基因） aaGG: 雄全同株； aagg: 完全花株。 使用62对甜瓜SSR引物和192对黄瓜SSR引物和1对CAPS引物对全雌株和雄全同株两种类型进行扩增，结果引物Alu1CAPS可以在两种类型间扩增出差异，全雌株有一条特征条带在300-400bp之间，雄全同株型的特征条带在500-600bp之间（图19）。 ? ? 图19 引物Alu1CAPS在全雌株和雄全同株两种花型上的扩增谱带 M：标准分子量 a：全雌株AAgg Gene b：雄全同株aaG gene ? 雌性性状的分子标记 ? 使用引物Alu1CAPS对F2群体进行扩增，从图20可以看出，3株全雌株（a）中有两株在300bp-400bp之间有一条特征带，如图中箭头所示；1株雌雄异花同株类型（c）与全雌株具有相同的谱带；雄全同株类型（b）中的3株有500bp-600bp之间的特征谱带，如图中箭头所示；2株完全花类型（d）都没有扩增出条带。 图20 引物Alu1CAPS在F2群体上的扩增谱带 M： 标准分子量， a： 全雌株AAgg Gene ，b： 雄全同株aaG gene， c： 雌雄异花同株AG gene， d： 完全花型aagg gene 共筛选了175对均匀分布在辣椒染色体上的SSR引物，用SSR标记将恢复基因定位于辣椒第六条染色体上，其中AF208834-SSR、CRF-SCAR及AFRF8-CAPS距离恢复基因的遗传距离分别为20.8cM、5.1 cM 、1.1cM。 辣椒CMS恢复基因MAS AF208834 31.9 CRF-SCAR 15.7 Rf 5.1 1.1 PR-CAPS 1.1 OPP13-CAPS 17.8 HpmsE072 从35份恢复系自交系材料中检测出28份有特异带，分子标记鉴定的正确率为80%（理论上CRF-SCAR引物与Rf基因连锁距离为2.7cM，选择的准确率为97.3%）； 用CRF-SCAR引物对109份未知材料进行恢复基因的鉴定，结果41份有特异条带，并将其与不育的测交后代进行田间观察表明39份能恢复育性，准确率95.1%； 另外，对不育与恢复系杂交的F2群体中，对76个可育单株进行SCAR引物的PCR扩增，其中72株能得到目的片段，选择正确率为94.73%。 总的看，在材料鉴定和杂交后代中检测的准确率在80-95%。 利用CRF-SCAR标记筛选恢