- 1、本文档共15页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
仙人掌杆菌之检验
食品微生物之檢驗方法-仙人掌桿菌之檢驗
101年11月19日署授食字第1011902826號公告
1. 適用範圍:本方法適用於食品中仙人掌桿菌之檢驗。
2. 檢驗方法:檢體經系列稀釋後,以選擇性培養基培養及計數之方法或以三階三支進行培養,配合MPN計數之方法。
2.1. 工作環境:工作平台須寬敞、潔淨、光線良好,操作平台光度為100呎燭光以上,密閉室內換氣良好,儘可能沒有灰塵及流動空氣。每15分鐘落菌數不超過 15 C FU/培養皿。
2.2. 器具及材料
2.2.1. 乾熱滅菌器。
2.2.2. 高壓滅菌釜。
2.2.3. 冰箱:能保持5 ± 3℃ 。
2.2.4. 培養箱:能維持內部溫度溫差在 ± 1℃ 以內者。
2.2.5. 水浴:能維持水溫溫差在 ± 1℃ 以內者。
2.2.6. 攪拌均質器(Blender)或鐵胃(Stomacher):能適用於無菌操作者。
2.2.7. 天平:可稱量到 2 000 g 者,靈敏度為 0.1 g ;可稱量到 120 g 者,靈敏度為1 mg。
2.2.8. 旋渦混合器(Vortex mixer)。
2.2.9. 加熱器。
2.2.10.顯微鏡:能放大至1000倍之一般光學顯微鏡。
2.2.11. 光源:日光燈。
2.2.12. 吸管:已滅菌。 1 m L吸管應有 0.01 m L之刻度; 5 m L及 10 m L吸管應有 0.1 m L之刻度。
2.2.13. 培養皿:已滅菌,內徑約 90 mm ,深度約 15 mm ,底皿之內外面應平坦,無氣泡、刮痕或其他缺點。
2.2.14. 稀釋用容器:無菌袋或有1000 mL、500 mL、 99 m L或 90 m L標記附蓋(栓)之可滅菌廣口瓶。
2.2.15. 試管:20 × 150 mm ,13 × 100 m m 試管或其它適用者。
2.2.16. 無菌濾膜:孔徑0.45 μm或以下之親水性醋酸纖維濾膜。
2.2.17. 無菌棉花棒或塗抹棒。
2.2.18. pH測定儀。
2.2.19. 載玻片及蓋玻片:適用於染色及鏡檢者。
2.2.20. 接種針及接種環(直徑約3 mm):鎳鉻合金,鉑銥或鉻線材質,或可拋棄式者。
2.2.21. 針筒、藥勺、剪刀、小刀及鑷子:可滅菌或可拋棄式者。
2.2.22. 吸管輔助器(Pipette aid)。
2.2.23. 塗抹曲棒:可滅菌或拋棄式者,直徑3~ 4 mm ,塗抹端長45~ 55 mm 。
2.2.24. 濾紙、研缽、杵。
2.2.25. 褐色試藥瓶:可盛裝 300 m L以上者。
2.2.26. 試藥:氯化鈉、氫氧化鈉、磷酸氫二鉀(K2HPO4)、磷酸二氫鉀(KH2PO4)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)、硝酸鉀(KNO3,無亞硝酸鹽者)、結晶紫(crystal violet)、草酸銨(ammonium oxalate)、多粘桿菌素B硫酸鹽(polymyxin B sulfate)、碘化鉀、碘、沙黃O(safranin O)、30%過氧化氫溶液、冰醋酸(glacial acetic acid, 1.049 g /mL)、α-萘酚(α-naphthol)、氫氧化鉀、肌酸(creatine)、酪胺酸(tyrosine)、無水乙醇、95%乙醇、甲醇、鹽酸、液態石蠟油、礦物油、磺胺酸(sulfanilic acid)、鋅粉、孔雀綠(malachite green)、鹼性復紅(basic fuchsin)、TB石炭酸復紅ZN(TB carbolfuchsin ZN)、異丙醇(isopropanol)、石炭酸(phenol)、酚紅(phenol red)、葡萄糖(dextrose)及D-甘露糖醇(D-mannitol)均採用化學試藥級;溶菌酶(lysozyme)、 蛋白腖(proteose peptone)、胰化酪蛋白(trypticase)、蛋白腖(peptone)、去血纖維蛋白綿羊血(defibrinated sheep blood)、酵母抽出物(yeast extract)、牛肉抽出物(beef extract)、洋菜(agar)、胰化酪蛋白腖(trypticase peptone)、植物蛋白腖(phytone peptone)及 蛋白腖3號(proteose peptone No.3)均採用微生物級。
2.2.27. 試劑
2.2.27.1. 革蘭氏染色液(Gram stain solution)
2.2.27.1.1. 哈克氏(Huckers)結晶紫液(初染劑):
溶液A:取結晶紫 2 g 溶於95%乙醇20 mL。
溶液B:取草酸銨 0.8 g 溶於蒸餾水80 mL。
將溶液A與溶液B混合,靜置24小時後以
文档评论(0)