动物细胞培养课件.ppt

细胞贴壁  巩固训练1.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）? A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞? B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变? C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的? D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养2.讨论：动物细胞培养如何检测有毒物质毒性的大小？ * “水中的大熊猫” 中国一级重点保护动物 世界12种最濒危动物之一 白鳍豚 利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你能否利用动物细胞大量繁殖动物体，从而保护这些濒危动物呢？ 2.2 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 (基础) 常用 技术 手段 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 1.动物细胞培养的概念： 从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让 这些细胞生长和增殖。 （1）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是细胞增殖。 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 1.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 2.为什么要将组织块分散成单个细胞？ 3.如何将组织块分散成单个细胞？由此可说明细胞间的物质是什么成份？用胃蛋白酶行吗？为什么？胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？ 4.动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 5.培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 6.什么叫细胞贴壁？什么叫细胞的接触抑制？ 6.如何理解原代培养和传代培养？ 7.传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？ 8.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 9.动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 取动物组织块 剪碎组织 用胰蛋白酶处理分散成单个细胞 制成细胞悬液 转入培养液中 进行原代培养 贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液 转入培养液中 进行传代培养 放入二氧 化碳培养 箱中培养 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 2.动物细胞培养的过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 2.动物细胞培养的过程： (1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ (2)为什么要将组织块分散成单个细胞？ 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 2.动物细胞培养的过程： (3)如何将组织块分散成单个细胞？ (4)由此可说明细胞间的物质是什么成份？ (5)用胃蛋白酶行吗？为什么？ (6)胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？ 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质 不能，因为两者的最适pH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近 不会，因为胰蛋白酶处理时间短暂 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 2.动物细胞培养的过程： 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 2.动物细胞培养的过程： (7)动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ (8)培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ (9)如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理分散，摇晃，继续培养 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 2.动物细胞培养的过程： (10)如何理解原代培养和传代培养？ (11)传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？ (12)人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ (13)动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 动物组织消化后的初次培养就是原代培养，接触抑制后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不都能，发生突变，朝着癌细胞方向发展 保存10代以内的细胞，因为有少部分还发生突变向癌细胞方向发展 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 生物体内的细胞是生活在什么样的环境呢？ 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 3.动物细胞培养的条件： 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一. 动物细胞培养 3.动物细胞培养的条件： ①无菌