有关戊型肝炎病毒载体疫苗的研发.docVIP

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2017-04-11 发布于河北
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有关戊型肝炎病毒载体疫苗的研发.doc

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有关戊型肝炎病毒载体疫苗的研发

有关戊型肝炎病毒载体疫苗的研发　　戊型肝炎病毒是一种单链核糖核酸构成的无包膜病毒，通过粪Nave口途径传播，会导致人类的急性肝炎。当前市面上无戊型肝炎疫苗( HEV) 可用。HEV繁殖缺乏合适的细胞培养系统，HEV 假衣壳( ORF2蛋白) 既可以在大肠杆菌、也可以在昆虫细胞中产生，在猴子抗病毒和避免人感染 HEV 方面这种伪衣壳都是有效的。我们计划开发一种新的抗 HEV 感染的疫苗，其使用腺相关病毒( AAV) 作为 HEV 衣壳蛋白片段的基因表达载体。AAV 可以用杆状病毒表达载体系统在 Sf9 细胞中进行培养。为此，需要构建重组杆状病毒以及 BacRep 病毒库，需要在Sf9 细胞中制备针对 2、5、6 血清型的 BacCap。构建了编码截短的 HEV 衣壳蛋白的重组杆状病毒。第三代病毒滴度为 5.41 times;109PFU /mL; HEK 293 EB-NA 细胞用 rAAV 进行转导。HEV ORF2 的产生需要蛋白质印迹实验加以确认。在 Sf9 细胞中的 AAV生产优化正在进行中。