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浅谈HPLC 测定和胃平肝丸中芍药苷的含量 　　和胃平肝丸是舒气平肝，和胃止痛的良方. 用于肝胃不和，气郁结滞引起的两胁胀满，倒饱嘈杂，气逆作呕，胃脘刺痛，饮食无味. 芍药苷是其组成药物白芍的有效成分之一，具有显著的镇痛、镇静、抗惊厥作用. 本研究采用高效液相色谱法(HPLC) 对制剂中芍药苷含量进行测定. 实验证明该法准确、快捷、灵敏、重现性好. 　　1 仪器与试药 　　Waters 600-717-2996 高效液相色谱仪( 自动进样器，PDA 检测器;Empower 色谱工作站);芍药苷对照品( 中国药品生物制品检定所，批号110736-200630);和胃平肝丸为市售药物;乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为超纯水. 　　2 方法与结果 　　2. 1 色谱条件 　　Eclipse XDB-C18 色谱柱(4. 6 mm times; 150 mm，5 mu;m)，以乙腈-水( 11 ∶ 89 ) 为流动相，检测波长232 nm，流速1. 0 mL·min - 1，柱温30 ℃，进样量20 mu;L. 　　2. 2 对照品溶液的制备 　　精密称取芍药苷对照品1. 50 mg 于25 mL 容量瓶中，加甲醇使溶解制成每1 mL 含0. 060 mg 的溶液，作为对照品储备液. 　　2. 3 阴性对照品溶液的制备 　　按处方量称取除白芍外的药材，置具塞锥形瓶中，精密加70% 乙醇50 mL，密塞，称定重量，超声30 min，放冷，密塞，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，过0. 45 mu;m 有机微孔滤膜，作为阴性对照品溶液. 　　2. 4 供试品溶液的制备 　　取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约0. 5 g，精密称定，加入硅藻土0. 5 g，研匀，置具塞锥形瓶中，精密加70% 乙醇50 mL，密塞，称定重量，超声30 min，放冷，密塞，再称定重量，用70% 乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，过0. 45 mu;m有机微孔滤膜，作为供试品溶液. 　　2. 5 系统适用性试验及专属性考察 　　精密吸取对照品溶液、供试品溶液及空白对照品溶液各20 mu;L，分别按照上述色谱条件进样. 理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2 000，芍药苷峰与相邻色谱峰的分离度均大于1. 5. 　　2. 6 线性关系考察 　　分别精密吸取对照品储备液2，4，6，8，10 mu;L 进样测定，记录色谱图. 以进样量(X，mu;g) 对色谱峰面积积分值(Y)作标准曲线，并进行回归，计算得回归方程为:Y = 1 432 113X - 6 744，r = 0. 999 9，线性范围0. 12 ～ 0. 60 mu;g. 　　2. 7 稳定性试验 　　取同一批样品的供试品溶液，分别在0，1，3，5，8，12，18，24 h 进行HPLC 测定，记录峰面积积分值.芍药苷峰面积积分值RSD 为1. 59%. 　　2. 8 精密度试验 　　取同一批号的和胃平肝丸供试品0. 5 g，按2. 4项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件连续进样6 次，测定芍药苷峰面积，计算RSD 为0. 74%. 　　2. 9 重复性试验 　　精密称取同批样品6 份，按2. 4 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件进行测定. 测得芍药苷的平均含量( n = 6) 为0. 761 2 mg·g - 1，RSD 为2. 09%. 　　2. 10 加样回收率试验 　　取已知含量( 0. 761 2 mg·g - 1 ) 的同批样品6 份，每份约0. 25 g，精密称定，分别精密加入芍药苷对照品180 mu;g，按2. 4 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件进行测定. 结果平均回收率( n =6)为99. 41%，RSD 为1. 79%. 　　2. 11 样品含量测定 　　精密称取3 批和胃平肝丸样品，每批2 份，分别按2. 4 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件进行测定，按照外标法计算芍药苷含量. 　　3 讨论 　　3. 1 检测波长的选择 　　对芍药苷对照品溶液在190 ～ 400 nm 内做了紫外扫描，芍药苷在232 nm 处有强吸收峰，因此选择232 nm 为检测波长. 　　3. 2 流动相的选择 　　考察了不同比例的乙腈-水的流动相系统，结果表明，采用乙腈-水(11∶ 89) 作流动相时出峰时间较快，峰型较好. 　　3. 3 提取方法的选择 　　采用70%乙醇为提取溶剂