免疫学检测原理及临床应用.pptVIP

本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体有哪些信誉好的足球投注网站引擎，您身边的抗体专家! 免疫学检测原理及临床应用 相关帮助 需要相关抗体试剂的可以访问Fantibody全球抗体有哪些信誉好的足球投注网站引擎: fantibody全球抗体有哪些信誉好的足球投注网站引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体有哪些信誉好的足球投注网站引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台 需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网进行咨询，期待您的加入 内容提要： 概念 基于抗原-抗体反应的检测方法 免疫细胞检测 免疫分子检测 免疫学诊断与检测 概念： 免疫学 细胞生物学 分子生物学 应用：免疫相关疾病的诊断、病情检测和疗效评价等。 （一）抗原-抗体结合反应的特点 特异性 带现象与可见性 可逆性 抗原抗体结合的带现象与可见性 可逆性： （二）抗原抗体反应的影响因素 电解质 酸碱度 温度 抗原抗体的性质 （二）抗原抗体反应的影响因素 1.电解质： 亲水性---------疏水性 失去电荷------发生凝集 （二）抗原抗体反应的影响因素 2、酸碱度： 最适pH值：6—8 假阳性 假阴性 （二）抗原抗体反应的影响因素 3.温度： 适当温度------增加碰撞机会 加快结合速度 37℃ （二）抗原抗体反应的影响因素 4、抗原和抗体的性质 关键因素---特异性和亲和力 决定因素---二者的比例 （一）凝集反应（agglutination） 颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等）与抗体特异性结合，形成肉眼可见的凝集块。 （一）凝集反应（agglutination） 1、直接凝集(direct agglutination) 2、间接凝集 （indirect agglutination） 3、间接凝集抑制试验 （in direct agglutination inhibition test） 4、协同凝集试验 （co-agglutination test） （二）沉淀反应（precipitation） 1、单向免疫扩散（single immunodiffusion） 常用于测定IgG、IgM、IgA、C3、C4等。 （三）补体参与的抗原抗体反应 1、50 %补体溶血试验（CH50测定） ——血清总补体量测定 酶：辣根过氧化物酶、硷性磷酸酶 1、免疫荧光法（immunofluorescence,IF） 用荧光标记抗体，再与待检标本中抗原反应那个，所形成的抗原抗体复合物在荧光显微镜下散发荧光，借此对抗原进行定性和定量。 3、免疫组化 (immunohitochemistry) 应用标记的抗体与组织或细胞抗原反应，借助形态学观察，对组织或细胞表面抗原进行定性、定量、定位检测。 4、放射免疫测定法 （radioimmunassay,RIA） 用发射性核素标记抗体或抗原进行免疫学检测。 5、化学发光免疫分析（chemiluminescence immunoassay） 将发光物质标记抗原或抗体，发光物质在反应剂激发下生成激发态中间体，当回复至稳定的基态时发射光子，通过自动发光分析仪测定管子参量，可反应样品中抗体或抗原含量。 6、免疫印记法（immunoblotting） 又称western 印记法：结合凝胶电泳和固相免疫技术，将借助电泳所区分的蛋白质转移至固相载体，在应用酶免疫、放射免疫等技术进行检测。 第2节 免疫细胞检测 机体免疫功能状态的重要指标 免疫细胞来源---外周血 （3）洗淘法（panning）（4）流式细胞仪（flowcytometry,FCM） 3、淋巴细胞亚群计数 免疫荧光计数 微量细胞毒试验 1、细胞增殖试验具体方法 ①形态学观察法 ②3H-TdR渗入法：用液体闪烁仪测定样品的β射线放射活性 ③MTT法 （2）淋巴细胞介导的细胞毒试验（LMC） ——检测CTL、NK、 LAK、TIL细胞杀伤靶细胞的功能 ①51Cr释放法 ②乳酸脱氢酶释放法 ③ 细胞凋亡检查法：TUNEL法（TdT dependent dUTP-biotin nick end labeling）、FACS测定法 （3）分泌功能测定 检测细胞因子分泌细胞 检测抗体形成细胞 （一）免疫球蛋白测