实验三：果蝇的双因子实验总汇.doc

专业班级：12级生物技术02班 姓名：杞正富 实验三 果蝇双因子实验 一：目的 1：掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方法 2：通过双因子杂交，验证和加深理解遗传学基本规律---------自由组合规律 3:验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律 二：原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因的自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长翅与残翅，黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体和残翅黑檀体的双因子杂交实验，旨在验证自由组合定律。黑檀体果蝇（e）的体色乌黑，与黑色（b）相似，但是它们是不同染色体上基因所决定的，与（e）相对应的野生型性状是灰体，（e）的座位是第3条染色体70.7。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，与（vg）相对应的是野生型长翅，（Vg）的座位是第二条染色体67 。交配方式：由于（e）和（vg）是在不同对的染色体上，两对因子杂种在形成生殖细胞时会产生四种不同的类型，比例为1:1:1：1.如F1个体相互交配，则通过♀♂配子相互交配，在子二代可以得到16种组合，其中9种灰长，3种黑长，3种灰残，1种黑残，其表现型为9:3:3:1.若用反交，其结果同前面正交相同，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，所以做雌体比较好，若作雄本，得到的子代将减少很多。 三：材料与方法 材料：黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）的突变品系， 3.1方法 3.1.1：配置培养基 根据本实验的需要配制培养基（群体规模越大越好配置培养基的方法如下（每300ml的配方） A 葡萄糖 23.5 g 琼脂：2.45 g 蒸馏水：150 ml B 玉米粉 30.9375 g 水 ：150ml 加水搅拌均匀后加入酵母粉：2.625 g 将A和B混合后加热成糊状，加 1.875 ml丙酸，即可分装到培养瓶中 3.1.2：收集雌果蝇的处女蝇 3.1.3：装备好培养基，把已麻醉的的残翅♀♂果蝇和黑檀体果蝇♀♂果蝇，按正反交方式放入不同的培养基内，进行杂交，贴好标签，标签形式如下 VgVg++ × ++ee ♀ ♂ 日期 姓名 ++ ee × vgvg++ ♀ ♂ 日期 姓名 3.1.4：6——7天后，见到有F1幼虫出现，可除去亲本（除干净） 3.1.5：再过3——4天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体长翅（正反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇，F1幼虫出现后亲本未倒干净，杂交时雄果蝇选择有误：以及亲本原种不纯等等 3.1.6：按原来的正反交各选5——6对F1成蝇（♀ ♂），换新的培养基，继续饲养（此时不需要处女蝇） 3.1.7:7天后，除去F1代亲本 3.1.8：再过4天，F2代成蝇出现，麻醉以后（可深度麻醉），倒在白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计8天（在F3代出现前统计完） 四：结果与分析 表1 F1代正交统计结果登记表 观察 日期 正交：灰体残翅 （♀）× 黑檀体长翅（♂） 灰体长翅数 灰体残翅数 黑檀体长翅数 黑檀体残翅数 4.23 7 0 0 0 4.26 23 0 0 0 4.28 16 0 0 0 5.1 29 0 0 0 合计 75 0 0 0 表2 F2代反交结果做x 2测验 灰体长翅数 灰体残翅数 黑檀体长翅数 黑檀体残翅数 合计 实际值（ o ） 219 77 68 15 379 理论值（ c ） 213.1875 71.0625 71.0625 23.6875 偏差（ o － c ） － 5.8175 5.9375 3.0625 8.6875 (o － c) 2 /c 0.158477 0.496122 0.131981 3.186181 f 3 x 2 3.972761 P 0.20 ﹤ P ﹤ 0.30 由表2计算结果查卡平方，P 0.05 说明符合两对对基因自由组合的假说.实验结果与预期结果相符，实验成功。 五：讨论与结论 此实验F1 中不要处女蝇这与前人做的相同。此次实验做的一般是黑腹果蝇的突变品种杂交实验。黑檀体突变型和残翅突变型为亲本——这时雌雄果蝇必须是处女