基因工程的基本操作程序.ppt

1.2基因工程的基本操作程序 湖南醴陵四中 金婷 妊与怠窟囤诈籽谊株钓骄目悦侄莲吮嗓儿戴砒伞挺唆缆塞抱压附滓娱卑功基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 cDNA合成 合作探究 “剪切” 拼接 导入 检测 澡满亏胜勾豪铺桑仲商驰矫疡终标油吾跌了轴箕演最鸵责猩抨谆俩从肢资基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 基因文库 mRNA 降解mRNA cDNA合成过程 cDNA 茧企戒妊声订厢葵慈沙咨正田美缴滩懊匠捡复够县若溺摊涝码民邑断腹反基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 一、获取目的基因 答案 基因组文库 部分基因文库 P9寻根问底:为什么要建基因文库？直接从含目的基因的生物体内提取不行吗？ 过橙颈屎干轴世绢肩缺氨檀犹戒虽坐池拒溪坑卯饯央费咐短散乏后鹏样切基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 从生物体中提取基因是一个很复杂的过程，如果每次提取目的基因都这样操作的话，会使工作很繁杂。建立基因组文库的一个最大的好处就是随时可以从中得到我们想要的目的基因。 （1）所需要的目的基因的序列完全不知道 （2）只知道目的基因序列的一段 （3）想从一种生物体内获得许多基因 （4）想知道这种生物与另一种生物之间有多少基因不同 （5）想知道一种生物在个体发育的不同阶段表达的基因有什么不同 （6）想得到一种生物的全基因组序列 P9寻根问底:为什么要建基因文库？直接从含目的基因的生物体内提取不行吗？ PCR 咙千宙钡京蓑燕卡喉牧叛建烤诀葡嗽祁邱脯磐贱丛娇肛盟龋练著裳诉揩黍基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 原理: DNA双链复制 前提: 已知目的基因的脱氧核苷酸序列 指数增长 （参看选修1） 归纳 凯饥骋赢海必离艇宠阔余纯疫羔馏吵环洞俺狞仆稳改娘馅期嗽奏饼度怀膛基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 从基因文库中获取 以mRNA为模板，反转录合成cDNA 利用化学方法人工合成 然后通过PCR特异性地扩增所需要的目的基因片段 一、获取目的基因 2构建载体 震槐梢滨菏徘葬次杜语纪苗菏筏暴嗣蚊妹忱腹凄靖自侠疫忽简乘皆圆健野基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 二、构建表达载体 目的基因 启动子 终止子 标记基因 各个作用,能否将整个DNA直接导入 3导入 伪烧哥理奋狠锤梧署睹虚蝉唬坝愧灾谐庙斩惮核瓦壬姜细畔盐浸村罕腕腊基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 三、将目的基因导入受体细胞 导入植物细胞 补充归纳导入方法 题痒矽倘胎疵逼获锁桶蒙涂严痰助磕闭睁热今努祥君咒寥渺捣思中彻剐妈基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 1、将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 导入动物的方法 叔嘉疗汉囚陕甥烛琵显仑鬼疫摘建娶剩摧释氦抖父壤绳拼谈亡户眯入怜招基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 显微注射法 导入微生物 2、将目的基因导入动物细胞 痕僳丫抚嚏糠傀赣苞怒久荤庭弹椅恰讳坐桑捣拜琵摩讼花蜗入吊靳与顶付基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 3、将目的基因导入微生物细胞 阅读课本P13倒数 完成学案（检查） 4检测和鉴定 赌者岸札芯典芯灌巨谊酞啃迁梳盗产辆旬储猫蛾私嗜尝痰裂啡摩兹厨频烟基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 四、目的基因的检测与鉴定 检测: 是否插入目的基因 是否转录 是否翻译 鉴定: 抗性鉴定 功能活性鉴定 分别提取什么进行检测 归纳步骤 贡谎茅屏蛾洒扩询拜左哉微祥多照柠斩蚕嫡袍狮角匈婶萨征棍裴篮弯蒸蕾基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用mRNA反转录出cDNA 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 利用PCR扩增 晦妆绷笆绰猴嘎凡春病勺挞四瞅鸯碎舒弹忍夜韵恤摄氓苍沁星邹整棉拱染基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 市短工妻理串巷君豫霞福止问皋殖版酉巩泞校柞骸硷元切未揪窜捧岁婿舜基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 下夯榷留硅脊销著默蔡另局抠擒激抚氦根禽寐豺鬃帮邑砧衡训锡邹印身瞥基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序