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实验五 微生物形态观察和酵母菌的简单染色及显微镜计数
演讲者： 张永涛
PPT收集：赵芳圆
赵 敏
张 舒
PPT制作：高思丹
张 宇
一 实验目的：
1、初步认识细菌、酵母菌、放线菌及霉菌的形态特征和大小
2、学习并掌握酵母菌的制片及简单染色技术
3、学习并掌握使用血细胞计数板测定酵母菌（微生物）数量的方法
显微镜计数
观察微生物大小原理见实验步骤
三 实验器材与试剂
1：普通光学显微镜，擦镜纸，香柏油，二甲苯，
2：酒精灯，载玻片接种环，滴管，吕氏碱性美蓝染液，革兰氏染色用碘液，普通光学显微镜
3；显微镜，血细胞计数板，凹载玻片，盖玻片，擦镜纸，软布，接种环，酒精灯，毛细滴管，玻璃小漏斗，小玻璃珠，试管，脱脂棉和三角烧瓶，香柏油，二甲苯，生理盐水和凡士林等
四 实验步骤
2 酵母菌的简单染色
㈠美蓝染液水浸片法
★滴加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央，无菌操作用接种环由酿酒酵母麦芽汁斜面培养物挑取少许菌体置于染液中，混合均匀。
★用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌液接触，缓慢将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上。
★将制片放置3分钟后，用低倍镜及高倍镜观察酵母菌形态及出芽情况，并根据细胞颜色区分死活细胞。
★染色30分钟后再次观察，注意死活细胞比例是否发生变化。
★用0.05%吕氏碱性美蓝染液作为对照同时进行上述实验
显微镜计数
你会了吗
实验结果
讨论
六 小结
1.显微镜计数时要把视野调暗，因为活细胞是透明的
2.（1）制片和染色时，用接种环将菌体与染液混合时 不要剧烈涂抹，以免破坏细胞
（2）滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时染液过多会溢出
（3）盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡
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