卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟影响的设计.doc

燕山大学 课 程 设 计 说 明 书 卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟影响的设计 指导 教师： 赵红卫 教师 职称： 讲 师  设计题目 卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟的影响 设 计 主 要 内 容 1.卵丘细胞存在对猪卵母细胞成熟的影响 2.卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响 设 计 要 求 1.提出设计方案前应充分查阅各种文献资料， 2.要有明确设计的目的,设计合理的操作方式 3.设计出合理的测定指标 4.设计的内容要与题目基本一致 5.设计 考 资 料 [1] 陈大元. 受精生物学[M]. 北京科学出版社, 2000, 51: 147-148. [2] 王海, 曾申明, 朱士恩. 培养介质、卵丘细胞和卵泡直径对猪卵母细胞体外成熟的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2002, 38: 15-16. [3] 钱云, 丁家桐, 刘红林. 卵母细胞成熟的形态学特征及其调控[J]. 国外畜牧科技, 2001, 26: 26-30. 指导教师签字 基层教学单位主任签字 说明：学生、指导教师、基层教学单位各一份。 年 月 日 2010-2011 秋季学期 生物工程专业课程设计 结题论文 摘 要 卵丘细胞是影响卵母细胞成熟的重要因素，尤其是包裹在卵母细胞周围的卵丘细胞。本设计主要探讨卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟的影响。设计内容主要分为两部分：卵丘细胞存在对猪卵母细胞体外成熟影响的设计；卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟影响的设计。第一部分设计拟定探索出卵丘细胞的存在能够提高卵母细胞体外培养成熟；第二部分设计是在第一部分的基础上分析卵丘细胞层数对母细胞成熟的影响。通过本次设计，拟定探讨卵丘细胞的存在和不同形态对猪卵母细胞的成熟率的影响。为提高卵母细胞的质量，使体外受精、细胞核移植、转基因及胚胎干细胞等技术研究的顺利进行，而作为这些研究基础环节的卵母细胞体外成熟技术尤为重要。 关键词：卵丘细胞；猪卵母细胞；体外成熟 目 录 第一部分 文献综述 1 1.哺乳动物卵母细胞体外成熟研究进展 1 1.1卵母细胞体内成熟的生理机理 1 1.2卵母细胞体外成熟的机理 1 2. 影响猪卵母细胞体外成熟的因素 2 2.1影响猪卵母细胞体外成熟的生理性因素 2 2.1.1 卵巢来源猪的年龄、品种及健康状况 2 2.1.2所采集卵巢所处的性周期 2 2.1.3采集卵巢离体时间及保存温度 3 2.1.4采集卵母细胞的方法 3 2.2影响猪卵母细胞体外成熟的物理性因素 3 2.2.1 体外成熟培养条件 4 2.2.2体外成熟培养时间 4 2.2.3体外成熟培养方式 4 2.3影响猪卵母细胞体外成熟的化学性因素 4 2.3.1成熟培养基 4 2.3.2激素 5 2.3.3血清 5 2.3.4卵泡液 6 2.3.5细胞生长因子 6 3.卵丘细胞与卵母细胞关系的研究进展 7 3.1卵丘细胞与卵母细胞在卵母细胞成熟过程中的结构与功能联系 7 3.2卵丘扩展对卵母细胞体外成熟的影响 8 3.3卵丘细胞层数对卵母细胞体外成熟的影响 9 3.4去除卵丘细胞的卵母细胞在体外成熟过程中的超微结构变化 10 第二部分 课程设计部分 11 1.实验材料 11 1.1 卵巢 11 1.2 实验用的仪器 11 1.3 实验试剂 12 2.方法 12 2.1 卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的收集 12 2.2猪卵母细胞的分级 12 2.3卵母细胞的成熟培养 13 2.4各组卵母细胞的成熟观察 13 3. 设计 13 3.1卵丘细胞存在对卵母细胞体外成熟的影响 13 3.2卵丘细胞层数对卵母细胞体外成熟的影响 13 4.分析与总结 14 4.1卵丘细胞存在对卵母细胞体外成熟的影响 14 4.2卵丘细胞层数对卵母细胞体外成熟的影响 14 5.设计体会 15 参考文献 16 第一部分 文献综述 1.哺乳动物卵母细胞体外成熟研究进展 1.1卵母细胞体内成熟的生理机理 卵母细胞成熟是指卵母细胞恢复和完成第一次减数分裂，进入并停滞于第二次减数分裂中期，此间伴随着胞浆成熟，即卵母细胞的成熟包括其核成熟和胞浆成熟两个方面[v]。核成熟是核膜破裂，同源染色体分离和排出第一极体；胞浆成熟是胞浆内各种蛋白组成达到一定水平及线粒体的有效重排。 1.2卵母细胞体外成熟的机理 卵母细胞体外成熟（IVM）是指在体外人工给定的条件下，哺乳动物次级卵母细胞经过一系列的生长发育最终形成有受精能力的成熟卵母细胞的过程。卵母细胞的体外成熟包括细胞核的成熟、细胞质的成熟、卵丘细胞的成熟、透明带的成熟以及其卵丘-卵母细胞复合体的发