革兰阳性球菌课稿.ppt

第六章 革兰阳性球菌 葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属 革兰阳性球菌 是指革兰染色为阳性的一群兼性厌氧球菌 通常引起各种化脓性感染 包括9个菌属 最重要的为葡萄球菌属、链球菌属和肠球菌属 一类触酶阳性的革兰染色阳性球菌，包括金葡、表葡、和腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌等。 金葡为其中最重要的致病菌，常引起化脓性感染。 第一节 葡萄球菌属（staphylococcus） 第一节 葡萄球菌属（staphylococcus） 一、生物学性状 1.形态与染色 球形，葡萄串状，革兰染色阳性 （G+） 一、生物学性状 1.形态与染色 在液体培养基中或脓汁标本中可见成单、成双或短链状排列。 无芽胞，无鞭毛，某些菌株可形成荚膜。 当细菌衰老、死亡、被吞噬后或在青霉素等药物作用下(可形成L型菌)，菌体可呈革兰阴性。 细菌L型—G- 第一节 葡萄球菌属（staphylococcus） 2.培养特性 营养要求低，易培养 普通平板 有色素 金黄色 白色 柠檬色 血平板 某些菌种溶血产生溶血环 2、培养特性 pH—7.4 温度—35~37摄氏度 菌落形态：2~3cm、圆形、凸起、表面光滑、边缘整齐、湿润不透明。 金黄色葡萄球菌在羊血琼脂平板上的典型菌落为金黄色、光滑整齐、微隆起、不透明菌落，其周围有明显的β溶血环. 在液体培养基中呈均匀混浊生长。 金葡菌在血琼脂平板上典型菌落 高盐甘露醇平板呈淡 橙黄色色菌落 3.生化反应 生化反应活跃，能够分解多种糖类（葡萄糖、麦芽糖等，产酸不产气，致病性葡萄球菌可分解甘露醇产酸）和蛋白质 触酶试验阳性 凝固酶阳性、耐热DNA酶阳性 4.抗原构造 1、蛋白抗原--葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A SPA） SPA能与IgG1、2、4的Fc段发生非特异性结合。IgG 的 Fab段仍可同Ag特异性结合——协同凝集反应。（co-agglutination）用于多种细菌抗原的检测。 2、多糖抗原：具有群特异性。 5.分类 35个种，17个亚种 主要致病性菌种： 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 头状葡萄球菌 人葡萄球菌 腐生葡萄球菌 凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS) 噬菌体分型、质粒分型、血清学分型等 6.抵抗力 对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。 能在含有10%～15%的NaCl琼脂中生长 对碱性染料（龙胆紫）敏感 易产生耐药性，特别对青霉素 二、微生物学检验 1．标本 根据不同病症和体征采集不同标本。 化脓性感染病灶采集脓汁、渗出液、穿刺液、咽拭子标本； 菌血症、败血症采集血液标本； 脑膜炎采集脑脊液标本； 食物中毒采集粪便、呕吐物或剩余的食物标本。 2．鉴定 　　(1)涂片革兰染色镜检：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见革兰阳性、呈葡萄串状排列的球菌，无芽孢，无荚膜，即可作出“查见革兰阳性球菌，葡萄串状排列，疑为葡萄球菌”的初步报告。 菌落的性状： （1）金葡：直径6~8mm，光滑、完整、稍隆起、半透明，金黄色或者橙黄色色素，并在菌落周围出现或不出现透明溶血环。 （2）表葡：5~6mm，某些产黏液株能黏附在平板表面，无色素或白色色素。 （3）溶血：光滑奶酪状，不透明，无色素或奶油色、黄色。 （4）里昂：边缘整齐稍扁，奶色或黄色。 （5）腐生：光滑、凸起、不透明、白色或柠檬色。 　(2)分离培养 　　1)血液、脑脊液等标本：接种增菌液培养基进行增菌，如增菌液发生混浊、内有胶胨样凝块等现象，可进一步转种血琼脂平板进行分离培养；如无细菌生长，须培养至7天，再转种血琼脂平板确定有无细菌生长。 2)脓汁、咽拭子、尿道分泌物等标本： 可直接分离培养于血琼脂平板。经24～48小时培养，可形成直径1～3mm或更大、不同色素的菌落。 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的菌落为金黄色，周围有明显的β-溶血环；部分菌落可呈灰白色或柠檬色。 尿标本必要时作细菌菌落计数。粪便、呕吐物或剩余的食物标本接种于高盐甘露醇平板或卵黄高盐平板。 金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上呈淡黄色菌落；表皮或腐生葡萄球菌呈白色或柠檬色菌落。 金黄色葡萄球菌在卵黄高盐平板上，其菌落周围形成白色沉淀环，而表皮或腐生葡萄球菌则无此现象。 (3)生化反应 　　1)触酶试验阳性。 　　2)血浆凝固酶试验：可用玻片法和试管法