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细胞免疫分型临床应用 细胞免疫分型临床应用 七 细胞遗传性分析 1、染色体检查方法 2、染色体分析 (1)染色体命名:①46条,22对常染色体,1对性染色体 ②男46XY,女:46XX ③A-G7组 七 细胞遗传性分析 2)核型分析及其书写: (1)书写顺序:染色体数目、性染色体、染色体异常 (2)染色体变异以小写表示: t—易位 iso或i——等臂染色 inv—倒位 ins——插入 del—缺失 r—环状染色 “—”-----丢失 “+”----增加 七 细胞遗传性分析 (3)第一括号内表示染色体数目,第二括号内表示染色体区带 (4)P表示短臂,q表示长臂 3、染色体畸变 (1)二倍体(2n) (2)数目畸变:整倍体和非整倍体 (3)亚二倍体:比2n少 (4)超二倍体:比2n多 七 细胞遗传性分析 七 细胞遗传性分析 单核细胞形态特点 血细胞的形态学特征(巨核细胞) (1)原巨核细胞(megakaryoblast):φ15-30um (2)幼巨核细胞(promegakaryocyte):φ30-50um (3)颗粒型巨核细胞(granular megakaryocyte):φ50-70um (4)产板巨(thronbocytogenous megakaryocyte)。 (5)巨核细胞裸核(naked nucleus) 巨核细胞形态特点 血细胞的形态学特征(其它细胞) (1)网状细胞 (3)纤维细胞 (2)内皮细胞 (4)组织嗜硷 (5)成骨细胞 (6)破骨细胞 骨髓中其它细胞 五 血细胞的细胞化学染色 POX染色 NAP染色 ACP染色 AS-D NCE染色 α-NAE染色 PAS染色 Fe染色 细胞化学染色一 POX 1、原理:细胞中的POX(peroxidase)→H2O2→O2→氧化联苯胺呈蓝色+亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒。 2、结果: (1)阴性:无颗粒 (2)弱阳性:细小颗粒分散 (3)强阳性:颗粒粗大而密集 3、意义: (1)急粒:强阳性 (2)急单;弱阳性 (3)急淋:阴性 POX结果判读 细胞化学染色二 NAP 1、原理:NAP(neutrophil alkaline phosphatase)的显示方法有偶氮偶联法: NAP(PH9.4-9.6)→α-磷酸茶酚钠→α-茶酚+重氮盐→形成灰黑色沉淀(定位于酶活性处)。 NAP结果判读 细胞化学染色二 NAP 2、结果: (1)5级分类 0级→阴性 1级→+ 2级→++ 3分→+++ 4分→4(+) (2)阳性率报告:计数100NC中阳性细胞分率。 (3)积分报告:100NC细胞的累积分数 细胞化学染色二 NAP 3、参考区间:NAP:阳性率:10-40% 积分:40-80分 4、临床意义: (1)感染性疾病的诊断:鉴别细菌或病毒感染 (2)CML和类白血病鉴别 (3)AA与PNH鉴别 细胞化学染色三 ACP 1、原理:ACP(acid phosphatase): ACP(PH5.0)——β甘油磷酸钠——磷酸钠+硝酸铅——磷酸铅沉淀+硫化铵反应——棕黑色硫化铅沉淀。 2、结果:胞质内出现棕黑色颗粒为阳性反应。 细胞化学染色三 ACP 细胞化学染色三 ACP 3、意义: (1)多毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCE)诊断:HCL为阳性不被L-酒酶抑制 (2)T-B淋巴细胞鉴别:T阳性,B阴性 (3)协助鉴别Gaucher病与Niemann-Pick病:Caucher阳性,Niemann-Pick阴性 (4)单核细胞、组织细胞、网状细胞、巨核细胞ACP阴性。 细胞化学染色四 CE 1、原理: AS-D(SE)——氯化醋酸AS-D萘酚——AS-D+重氮盐GBC偶联——红色沉淀定位于胞浆中 2、结果:粒系——阳性或强阳性反应 单核——阴性或弱阴性反应 淋巴、嗜酸细胞、浆细胞——阴性反应 3、意义: (1)急粒——阳性或强阳性 (2)急单、急淋——阴性反应 细胞化学染色四 CE 细胞化学染色五 NAE 1、原理:α-NAE——α-醋酸萘酚——α-萘酚+重氮盐染料偶联——黑色沉淀定位于胞浆中。 2、结果: 1、单核细胞——阳性(灰黑色沉淀) 2、粒细胞——弱阳性 3、淋巴细胞——阴性 3、意义: 1、急单——强阳性反应 2、急粒——弱阳性反应 细胞化学染色五 NAE 细胞化学染色六 PAS 1、原理:过典酸(糖原)——醛基+无色品红——紫红色化合物 2、结果: (1)阳性:颗粒状、小块状或弥漫均匀(红色强阳性、弱阳性和阴
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