第四章菌种生产课稿.ppt

（二）原种、栽培种培养基 三、培养基的灭菌 2.孢子分离(有性繁殖） 二、菌种质量的鉴定 形态特征、生理特性、栽培性状、经济效益等 鉴定项目 （一）母种质量的鉴定 、 菌丝白、整齐、粗壮、有弹性、萌发快等 1.外观 好 差 丝干燥、收缩、自溶产生红褐色液体等 返回本节 退化母种 好母种 返回本节 2.鉴定 耐干湿性试验 接入母种→正常生长 原种培养基含水量 ＜50% ＞70% 耐高温性试验 仍正常生长 适温培养7天 30~35 ℃锻炼24h 再适温培养 返回本节 出菇试验 栽培 出菇快产量高品质好抗逆性强 返回本节 （二）原种、栽培种质量的鉴定  具有 菌丝白（符合该菌种的颜色）均匀、粗壮、有菇香味接种后萌发快 菌种种类 品种名称 菌种级别 代 时 生产厂家 接种日期 用于生产 没有 无杂色、无黄水、无结皮、无原基、无干缩脱壁等现象 返回本节 产生原基 返回本节 黄水 污染 返回本节 第六节 菌种保藏与复壮 一、菌种保藏 （一）保藏目的及原理 （二）常用保藏法 （三）保藏注意二、菌种复壮 (一）菌种的衰退 （二）复壮方法 （三）防衰措施 返回本章 一、菌种保藏 （一）保藏目的及原理 目的 原理 创造不利于菌种生长的一切条件，使其代谢处于休眠状态。 使菌种 不生长 不死亡 不污染 不降低或不丧失其优良性 以尽量延长使用时间 返回本节 低温 干燥 无氧 缺营养 不利条件 返回本节 （二）常用保藏法 以母种形式保藏 特点 简便保藏时间短易污染及退化不适于草菇等菌类 1.斜面低温法斜面菌种置4~6℃冰箱中（3~6个月） 返回本节 （一）母种培养基的灭菌  无菌检验约30℃条件下→空白培养2~3天 灭菌与摆斜面 摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃） 20~30min 返回本节 母基灭菌与摆斜面 返回本节 （二）原种、栽培种培养基的灭菌 高压灭菌 1.5kg/cm2（152kpa、128.1℃）灭菌1~2h 返回本节 常压灭菌 100℃灭菌10h左右→再闷12h 要求 攻头、控中、保尾 返回本节 第四节 菌种的接种 一、无菌操作 二、母种的接种 (一）分离法 1.组织分离 2.孢子分离（二）转管法 三、原种、栽培种的接种 返回本章 概念：菌种移至新培养基上的过程关键：无菌操作 接种 在严格消毒灭菌条件下进行的操作 概念 一、无菌操作 接种环境消毒灭菌 酒精棉球消毒双手 开启的管口、瓶口靠近灯焰 拔出的棉塞勿触及任何地方 动作快，接种时间勿太长 要点 必备 返回本节 返回本节 特点 简便，易成功 保持原菌种性状 重复多易退化 不适于耳类 1.组织分离 组织 PDA 次生菌丝 培养 （一）分离法 步骤 返回本节 步骤 选种菇 外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、第1~2茬的子实体 取接 组织 纵剖（撕）菇体尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织放入新斜面中部 种菇 消毒 用燃烧的酒精棉球迅速擦拭 返回本节 孢子特点 菌龄小生命力强变异率高 孢 子分离法 难度较大 单孢分离 多孢分离 较简易 单孢分离的菌落 返回本节 多孢分离 概念 使许多孢子在同一培养基上，萌发后自由交配成次生菌丝的方法 步骤 种菇消毒 采收孢子 接种孢子 整菇插种法钩悬法孢子印法 返回本节 (1)种菇 消毒 菌柄去2/3 苞被 有：75%酒精棉球擦 0.25%新洁尔灭浸2~3min无菌纱布吸干表面水分 无 返回本节 (2)采收孢子 整菇插种法 种菇插在孢子收集器中使孢子散落于培养皿内的方法 用前灭菌 25℃、24h现孢子粉取出分离材料培养皿盖严 返回本节 钩悬法 25℃、24h现孢子粉取出分离材料 返回本节 孢子印法 返回本节 (3)接种孢子 用接种环蘸孢子液或孢子粉涂布于平板上 返回本节 返回本节 （二）转管法 注意 种块勿太大 原老种块勿再接入 传代次数勿太多 将母种移入新的过程 概念 过程 接种环取绿豆粒大母种移入新斜面中部 返回本节 转管 返回本节 三、原种、栽培种的接种 接原种 用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上 返回本节 返回本节 接栽 培种 用接种匙（镊、铲）取枣大原种 放于袋的两端或瓶中料面上 表面老菌丝及老种块勿接入 返回本节 栽培种接种 返回本节 第五节 菌种培养与质量鉴定 一、菌种培养 （一）培养条件（二）技术环节 二、菌种质量鉴定 （一）母种质量鉴定（二）原种和栽培种质量鉴定 返回本章 (一)培养条件 场所清洁 空气清新 光线暗 空气湿度60%~70% 温度约25℃ 一、菌种培养 返回本节 （二）技术环节 1.母种培养 及时挑拣污染管 分离的母种要纯化→出菇试验 →使用 控