MICM检测在恶性血液病中运用.ppt

MICM检测在恶性血液病中的运用 曾雁玲 外周血涂片检测（血液病血常规）：用来观察外周血细胞形态、数量。是对血液分析仪检测的血常规的镜下检测补充。 检测内容包括：白细胞如粒细胞、单核细胞、淋巴细胞；红细胞；血小板。 骨髓涂片检测： 1、骨髓增生程度，G:E，骨髓小粒及脂肪油滴有无及分度。 2、粒细胞系统、红细胞系统、淋巴细胞系统、单核细胞系统、巨核细胞系统、浆细胞系统以及其他细胞（网状细胞、内皮细胞、纤维细胞、成骨细胞、破骨细胞、组织嗜碱细胞、退化细胞等）的形态及比例。血小板的情况。 3、骨髓小粒 4、有无转移瘤和寄生虫。 骨髓病理检测：在高倍镜下观察骨髓的组织结构和各成分的分布及相互关系。 骨髓活检和骨髓/血涂片 二、细胞组织化学染色 以形态学为基础，运用化学或生物化学技术研究细胞内化学成分的分布及变化的检测方法。对某些血液病的诊断、鉴别诊断、疗效、判断预后有一定的意义。 常用的细胞化学染色有： 1、过氧化酶又称髓过氧化酶(Myeloperoxidase，MPO或POX) ：阳性为棕黑色。用于急性白血病的鉴别：急性粒细胞白血病为阳性，其中M3为强阳性，急性单核细胞白血病为弱阳性，急性淋巴细胞白血病为阴性。 2、非特异性酯酶（NSE）：包括中性非特异性酯酶（α-NAE，棕黑色）、酸性非特异性酯酶（A-NAE，棕红色），碱性非特异性酯酶（ α-NBE，棕红色） 。 意义：急性单核细胞白血病强阳性，且能被氟化钠抑制。急性粒细胞白血病弱阳性或阴性，不被氟化钠抑制。 3、特异性酯酶（SE）：阳性红宝石色颗粒。 意义：急性粒细胞白血病阳性或强阳性。急性单核细胞白血病阴性。慢粒急粒变阳性增强。 4、苏丹黑B染色（SBB）：阳性为黑色。 意义：和POX基本一样。 5、中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）：阳性为灰黑色或黑色。计算阳性率和积分值： 阳性率：计数100个中性杆状核和分叶核粒细胞，观察其阳性细胞的个数，即为阳性率。(正常值＜40%) 阳性指数：（+）×1 +（++）×2 +（+++）×3 +（++++）×4 的总和。（正常值40-80分） 意义：升高见于严重感染，类白，急淋，骨纤，真 红，再障，ITP,淋巴瘤等。 降低见于慢粒，急性粒细胞白血病，PNH。 故可用于慢粒和类白、骨纤；再障和PNH；急粒和急淋的鉴别。 6、糖原染色（PAS）： 阳性为红色。可以计算阳性率和阳性指数。 意义：（1）正常情况下，红细胞系统的原、 幼红细胞和成熟红细胞；粒细胞系统的原粒细胞、 原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒 阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。 （2）急淋、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应；缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、MDS亦可呈阳性反应；急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。 （3）帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞，巨核细胞呈强阳性反应；霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。 （4）帮助鉴别白血病细胞和腺癌骨髓转移的腺癌细胞，腺癌细胞呈阳性反应。 7、酸性磷酸酶染色（ACP）：阳性酶活性部位出现红色沉淀，胞核为蓝色。 意义：1、鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞，前者阳性，后者为阴性。 2、多毛细胞白血病为阳性反应，且耐L-酒石酸的抑制作用。淋巴肉瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病的淋巴细胞，酸性磷酸酶染色也呈阳性反应，但此酸可被L-酒石酸抑制。 3、T淋巴细胞呈阳性反应，而B淋巴细胞为阴性反应。 8、铁染色（Fe染色）：阳性为淡绿色。 细胞内铁观察有核红细胞； 细胞外铁观察骨髓小粒及网状细胞。 意义： （1）铁低见于缺铁性贫血； （2）铁高见于再生障碍性贫血、巨幼红细胞性贫血、白血病、感染和多次输血病人 ； （3）环形铁粒幼细胞（RS），环铁大于15%， 见于RAS。 三、免疫分型 应用：1、确定系来源：利用不同系有特定的抗原表达可以确定髓系/B系/T/NK系/组织细胞和树突状细胞。 2、确定细胞分化阶段：不同发育阶段细胞，其抗原表达不同。 3、预后判断：有些抗原表达和淋巴瘤/白血病预后相关，如白血病患者有CD7+与CD34+共表达，示预后不好。 4、治疗方法选择-治疗靶向 5、疗效判断、复发监测 所以我们可以用于血液疾病的诊断如白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、MDS等；以及一些疾病的鉴别诊断如再障、ITP、MP