沙门氏菌检验.pptVIP

沙门氏菌及其检验 一、概述 在微生物分类学中，沙门氏菌属（Salmonella）是肠杆菌科的一个大属，包括2000多个血清型，它们在形态结构、培养特性、生化特性和抗原构造方面都非常相似，是一类形态短小的革兰氏阴性杆菌，主要寄居于人和其它温血动物的肠道中，可引起多种性质的疾病，根据沙门氏菌的致病范围，可将其分为三大类群。 第一类群：专门对人致病。如伤寒沙门氏菌,甲型、乙型、丙型副伤寒沙门氏菌。 第二类群：能引起人类食物中毒，称之为食物中毒沙门氏菌群，如鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌等。 第三类群：专门对动物致病，很少感染人，如马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌，此类群中尽管很少感染人，但近年也有感染人的报道。 * 根据侵入机体沙门氏菌菌种的不同，在临床上引起四种不同的疾病: （1）伤寒、副伤寒 由沙门氏属中的伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。 （2）食物中毒 沙门氏菌属引起的食物中毒，主要以肠炎杆菌、鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌和汤普逊杆菌等最为多见。临床症状主要是胃肠炎。病程较短，一般2~4d, 可完全恢复。 （3）败血症 多为猪霍乱杆菌引起，甲、乙、丙型副伤寒杆菌和肠炎杆菌亦可引起败血症。 （4）慢性肠炎 沙门氏杆菌可引起慢性、持久性肠炎。 * 沙门氏菌广泛分布于自然界，是引起食物中毒的重要病原菌。在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。 沙门氏菌不产生外毒素，但能产生毒力较强的内毒素。 沙门氏菌主要通过食物、饮水经口感染。可存在多种食物中，包括生肉、禽、蛋、奶制品、虾、鱼和田鸡腿等。 * 二、沙门氏菌的生物学特性 1、形态与染色特性：革兰氏阴性短杆菌，无芽孢,一般无荚膜，周生鞭毛（除鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外），大多数具有菌毛。 2、培养特性：需氧或兼性厌氧；普通营养琼脂上生长良好，菌落中等大小，无色半透明、圆形、光滑、湿润。 * 3、生化特性： 大部分发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨酸产气； 一般不发酵乳糖和蔗糖，不发酵侧金盏花醇； 一般不产吲哚，V-P反应阴性； 不分解尿素，苯丙氨酸不脱氨； 三糖铁琼脂斜面常产生H2S。 赖氨酸脱羧一般阳性 4、抵抗力：较弱，不耐热，最适温度37℃，最适pH6.8-7.8。 5、毒素特征：不产外毒素，产毒性很强的内毒素，这是致病的主要原因。 * 6、血清学特性： 沙门氏菌具有复杂的抗原结构。虽然沙门氏菌具有O、H、K和其它表面物质(如菌毛)四种抗原，但只有O抗原是每个菌株均有的成分。 1）O抗原（菌体抗原） *存在于菌体表面，为脂多糖，多糖部分决定其特异性， *O抗原耐热(100℃、2.5h或121℃、2h加热均不破坏其抗原性)，其特异性不易丧失或变异。 *一个菌体具有一种或多种不同的O抗原。 * 2）H抗原（鞭毛抗原） *H抗原存在于鞭毛中，不耐热，化学成分蛋白质，其抗原性可以被酒精所破坏。 *H抗原可分为两相 第1相：为特异相，用小写英文字母表示，a～z，Z以后则从z1、z2……，已编到z83。 第2相：为非特异相以阿拉伯数字表示，共7种。 具有第1相和第2相H抗原的细菌称为双相菌，大多数沙门氏菌属于此； 仅有一相者称单相菌，如肠炎沙门氏菌。 极少数无鞭毛菌两相抗原都不具有，称为无相菌，如鸡白痢沙门氏菌。 * 3） Vi抗原（包膜抗原） 少数沙门氏菌中尚有一种表面包膜抗原，功能与大肠杆菌的K抗原类同，因一般认为它与毒力(Virulence)有关，故称Vi抗原。能阻止O抗原与相应抗体结合； 经过几次传代、60℃热处理或石炭酸处理后容易消失。 * 三、 生化反应 * 1、吲哚试验( indol test) 细菌产生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。 色氨酸→ 吲哚（无色）＋对二甲基氨基苯甲醛→ 玫瑰吲哚（红色，+ 大肠杆菌） 不产吲哚（无色，- 产气杆菌） 试验方法：取培养24h培养液，先加入少量乙醚，摇动试管以提取和浓缩吲哚，待其浮于培养液表面后，再沿试管壁徐缓加入吲哚试剂数滴，在接触面呈红色，即为阳性。 应用：用于肠道杆菌的鉴定 * Indol test 吲哚试验 tryptophan色氨酸→indole吲哚→玫瑰吲哚 ↑ Kovacs reagent吲哚试剂 （对二甲基氨基苯甲醛） - + E.coli 蛋白胨水试管 * 2、尿素酶（