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2.2 动物细胞工程 动物细胞培养 概念:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 培养过程: 动物组织培养的条件 无菌、无毒的环境 营养:合成培养基 温度和pH 气体环境 动物细胞培养的应用 1、 许多有重要价值的蛋白质生物制品,如病毒疫苗、干扰素、克隆抗体等,都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。 2、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养,可以获得大量自身的皮肤细胞,为大面积烧伤的病人移植。 3、培养的动物细胞用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后,培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数,可以判断某种物质的毒性。 4、医学家培养各种正常的或病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据。 动物细胞培养与植物组织培养的比较: 一、动物核移植 将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8吨,创造了世界奶牛产奶量最高纪录.目前世界各国高产奶牛场的奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3-4吨. 能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗? 让羊产牛奶,科学家对此做了相关的构想,过程如下图所示: 牛乳蛋白基因 羊M受精卵 产牛奶的羊N 羊O 细胞核 去核卵细胞 小羊a 羊1 小羊b 羊2 早期胚胎 重组细胞 小羊c 羊3 1.图中涉及的现代生物技术有:(至少写出三种) 2.小羊a、小羊b、小羊c的性状是否相同,请说明理由 3.小羊a与羊N的性状是否相同,为什么? 4。研究发现羊N细胞中线粒体发达,故而它的产奶率高,则小羊a会有这一优良性状吗?为什么? 5。有人设想将羊体细胞与牛体细胞进行融合,以获得新物种“羊-牛”,你认为这一构想能否实现? * * 动物机体组织 单个细胞 原代培养 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 稀释 分装 传代培养 一、动物细胞培养 1、过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 (分解弹性纤维) 思考: 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料? 1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处? 主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考并讨论以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件? 充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境 无菌、无毒的环境。 动物细胞培养 植物细胞培养 比较项目 原 理 培养基 结 果 培养目的 细胞的 全能性 细胞的增殖 固体;营养 物质;激素 液体;营养 物质动物血清 培养成植株 培养成细胞系或细胞株 快速繁殖培养无病毒植株等 获得细胞的产物或细胞等 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 二、体细胞核移植的过程 黑面绵羊去核卵母细胞 供体细胞 培养 重组细胞 早期胚胎 另一头绵羊的子宫 克隆羊多利 培养黑面绵羊卵母细胞至减二中期 取白面绵羊乳腺细胞 显微操作 三、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植 四、体细胞核移植技术存在的问题 克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚,克隆技术效率低,克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。
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