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第八章糖类的测定
4 测定方法 (1)样品处理 称样→脱脂→去可溶性糖→定容,过滤 (2)酶水解 滤液→糊化→冷却→加酶水解→验证水解程度→加热杀酶→冷却→转移定容→过滤 (3)酸水解 滤液→水浴回流水解1h →冷却→加甲基红→调pH值→转移定容 (4)测定 按还原糖测定方法进行。 5 结果计算 糊化 淀粉总量的测定 淀粉 淀粉溶液 直链淀粉和支链淀粉的线性及分支的水解片段 D-葡萄糖 显色 1.葡萄糖氧化酶 2.过氧化氢酶反应并发色 葡萄糖淀粉酶 α-淀粉酶 (三)旋光法 1 原理 淀粉具有旋光性,在一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度成正比。用氯化钙溶液提取淀粉,用氯化锡沉淀提取液中的蛋白质,测定旋光度,通过计算得淀粉含量。 2 应用范围及特点 本法适用于淀粉含量较高,而可溶性糖类含量很少的谷类样品,如面粉、米粉等。方法操作简便、快速。 2 测定方法 样品粉碎→称样→加水→加氯化钙提取→煮沸15min →冷却→转移→加氯化锡沉淀杂质→定容(以氯化钙溶液) →过滤→测旋光度 3 结果计算 (四)肉制品中淀粉的测定 (五)直链淀粉的测定 淀粉溶液/悬浮液 直链淀粉和支链淀粉的线性片段 麦芽糖 此值与完全糊化的 淀粉所得的值相比较 分支酶 β-淀粉酶 还原糖测定 淀粉糊化度测定 §8. 4 纤维的测定 纤维是植物性食品的主要成分之一,广泛存在于各种植物体内,其含量随食品种类的不同而异,尤其在谷类、豆类、水果、蔬菜中含量较高。 “粗纤维”用来表示食品中不能被稀酸、稀碱所溶解,不能为人体所消化利用的物质,包括食品中部分纤维素、半纤维素、木质素及少量含氮物质,不代表食品中纤维的全部内容。 “膳食纤维”是指食品中不能被人体消化酶所消化的多糖类和木质素的总和。它包括纤维素、半纤维素、戊聚糖、本质素、果胶、树胶等。 “膳食纤维”比“粗纤维”更能客观、准确地反映食物的可利用率。 一、粗纤维的测定(重量法) 1 原理 样品在热的稀硫酸作用下,水解除去样品中的糖类杂质干扰,经热的氢氧化钾处理,除去蛋白质、脂肪干扰。再用乙醇印乙醚处理以除去单宁、色素及残余的脂肪,所得的残渣即为粗纤维,如其中合有无机物质,可经灰化后扣除。 2 适用范围与特点 适用于各类食品,是应用最广泛的经典分析法。 方法操作简便、迅速 3 测定方法 (1)样品酸解 称样20~30g(5.0g干样) →锥形瓶 加1.25%硫酸200ml(预先煮沸)→锥形瓶 加热回流30min(保持微沸) (2)过滤,沸水洗涤 (3)碱解 滤渣+1.25%氢氧化钾200ml(预先煮沸) →锥形瓶 加热回流30min(保持微沸) (4)过滤,沸水洗涤 (5)乙醇洗涤、乙醚洗涤 (6)烘干(105℃)至恒重 (7)灼烧(550℃)至恒重 4 结果计算 二、中性洗涤纤维(NDF)的测定 1 原理 样品经热的中性洗涤剂浸煮,水洗去除蛋白质、游离淀粉、矿物质,加入淀粉酶水解结合态淀粉,再经水、丙酮洗涤去除脂肪、色素等,残渣经烘干即为中性洗涤纤维。 2 适用范围 适用于谷物及其制品、饲料、果蔬等样品, 对于蛋白质、淀粉含量高的样品,易形成大量泡沫。粘度大,过滤困难,使此法应用受到限制。所测结果包括食品中全部的纤维系、半纤维素、木质素,最接近于食品中膳食纤维的真实含量,但不包括水溶性非消化性多糖,这是此法的最大缺点。 3 测定方法 (1)样品处理 样品→粉碎→称样→(脱脂) →锥形瓶 (2)中性洗涤剂洗涤 中性洗涤剂→锥形瓶 十氢钠→锥形瓶 50mg无水亚硫酸钠→锥形瓶 煮沸1 h(保持微沸) (3)过滤,沸水洗涤 (4)加入淀粉酶,抽滤 (5)加入淀粉酶,水解1h (6)抽滤,丙酮洗涤 (7)烘干,称量 (8)结果计算 三、酸性洗涤纤维(ADF)的测定 1 原理 样品经磨碎烘干,用十六烷基三甲基溴化铵的硫酸溶液回流煮沸,除去细胞内容物,经过滤、洗涤、烘干,残渣即为酸性洗涤纤维。 2 测定方法 (1)样品磨碎(16目)→干燥 (2)称样 (3)加入酸性洗涤剂,加热回流2h。 (4)过滤 (5)水洗 (6)丙酮洗涤 (7)烘干,称量。 (8)结果计算 四、膳食纤维的测定 1 甲醇回流,去除低分子糖类、色素、脂肪、蜡质等 2 酶解,乙醇分离去除淀粉水解物 3 热水抽提水溶性多糖,乙醇沉淀→离心分离→硫酸酸解→碱液中和→测定已糖、戊糖、糠醛酸等,得水溶性非消化性多糖 4 残渣→酸解→乙醇沉淀→离心分离→水解液中和→测定已糖、戊糖、糠醛酸等,得水不溶性非消化性多糖 5 残渣→高浓度低温酸解→中和→抽滤分离→水解液中和→测定已糖、戊
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