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第四节种子扩大培养一种子扩大培养的任务工业生产规模的
菌种扩大培养的目的 六. 工业微生物培养的类型 通气培养法:生产菌种以需氧菌和兼性需氧菌居多,它们生长 的环境必须供给空气,以维持一定的溶解氧水平 , 使菌体迅速生长和发酵,也称为好气性 培养 (aerobic culturing)。 2 固体培养(发酵)法(solid culturing): 固体培养又分为浅盘(shallow pan)固体培养和深层固体培养,统称曲法培养。它起源于我国酿造生产特有的传统制曲技术。其最大特点是固体曲的酶活力高。 * * 第四节 种子扩大培养 一. 种子扩大培养的任务 工业生产规模的增大 需要种子就增多 种子的扩大培养 种子扩大培养的任务,不但要得到纯而壮的培养物,还要获得活力旺盛的、性能稳定、接种数量足够的、纯的培养物。 菌种的活化与种子的扩大培养的区别? 为发酵罐的投料提供足够数量的代谢旺盛的种子。因为发酵时间的长短和接种量的大小有关,接种量大,发酵时间则短。将较多数量的成熟菌体接入发酵罐中,就有利于缩短发酵时间,提高发酵罐的利用率,并且也有利于减少染菌的机会。 对于不同产品的发酵过程来说,必须根据菌种生长繁殖速度快慢及生产的规模决定种子扩大培养的级数。 二. 种子扩大培养(制备)阶段 实验室种子的制备: 生产车间种子制备: A 实验室种子的制备: e.g 产黄青霉菌(P.chrysogonum) 原始菌种 斜面试管 获得孢子 250ml 茄子瓶(大米或小米) 25 ~28 ℃ ,4~14天 成熟(在真空下抽去水分,使水分含量在10%以下 ,于4 ℃冰箱保存)。 对于不产孢子的赤霉素生产菌(Gibberelline fujikuroi),也可用大米固体培养基在茄子瓶中培养菌丝体,用作种子罐种子。 产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种,如产链霉素的灰色链霉菌(S.griseus ),产卡那霉素的卡那链霉菌(S.kanamyceticu),可以用摇瓶液体培养法,孢子接入含液体培养基的摇瓶中,于摇床上培养,获得菌丝体,作为种子。 不产孢子的细菌,如生产谷氨酸的棒状杆菌(Corynebacterium)、短杆菌(Brevibacterium),生产上一般采用斜面营养细胞进行扩培,再转入液体摇瓶培养,获得细胞悬液再接种。 e.g. Glutamic acid-producer:(谷氨酸生产菌) 原始菌种(出发菌种) 固体试管斜面(32 °C ,18~24小时) 三角瓶培养(摇床)(flask culture) 种子罐培养 e.g. yeast: 原始菌种(出发菌种) 10ml 麦汁试管 250ml 三角瓶培养 (27 °C ~28 °C ,3天) (25°C, 2天) 5~10 L卡氏罐 (15 °C ~20 °C ,3~5天) B:生产车间种子制备: 种子罐的作用:使有限数量的孢子(菌体)发芽、生长、并繁殖成大量的菌丝体(菌体),满足发酵罐的需要(菌体生长和产物形成)。实验室种子进入种子罐有孢子进罐法和摇瓶菌种进罐法。 种子罐级数的确定:种子罐级数是指制备种子逐级扩培的次数。 依据:菌种生长特性,孢子发芽及菌体繁殖的速度以及所用的发酵罐的容积。 种子罐(
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