实验12 邻菲咯啉分光光度法测铁.ppt

1. 仪器 722型分光光度计，比色管（50 mL）、 比色皿（1 cm）、移液管（1、2、5mL）。 2. 试剂 Fe2+ 标准溶液(10mg·L?1)、盐酸羟胺(10%水溶液，新鲜配制)、NaAc-HAc缓冲溶液 (1.0 mol·L?1 )、 邻菲咯啉（0.15%水溶液）、待测试液。  实验目的 实验原理 实验步骤 注意事项 仪器试剂 问题讨论 实验12 邻菲咯啉分光光度法测定铁 数据处理 吸收曲线与工作曲线的绘制。 实验目的 1. 学习分光光度法测定Fe的基本原理。 2. 掌握722型分光光度计的使用方法。 3. 学习绘制吸收曲线的方法，掌握绘制标准曲线 的方法。 重点 722型分光光度计的使用方法。 难点 实验原理 因Fe3+与邻菲咯啉反应生成3:1的淡蓝色配合物，所以首先用盐酸羟胺还原Fe3+到Fe2+ ，然后再配位反应生成桔红色的配合物，测定总铁。 该配合物λmax = 510nm，为减小离子干扰，配位反应pH ? 5的条件下进行。 1. 显色原理 2. 测定原理——朗伯比尔定律 A= ?bc ?为摩尔吸光系数；b为液层厚度 本实验配合物的ε =1.1×104L·cm-1 ?mol-1 A= ?bc = kc 吸收曲线A-λ 标准曲线A-c 仪器试剂 1. 显色溶液的配制： 按表2 配制标准溶液及待测样品，静置5 min。 2. 制作吸收曲线： 以试剂溶液（1号）为参比，用6号溶液测定。 按表1 在440 ~ 560 nm间每隔10 ~20 nm测一次 吸光度， 以波长?为横坐标，吸光度A为纵坐标， 绘制吸收曲线，从而选择测铁的合适波长。 实验步骤 3. 标准曲线的制作： 在最佳波长处（一般为510 nm），以试剂 溶液为参比，依次测定各溶液的吸光度值。 以Fe标准溶液的浓度c (Fe2+)为横坐标，吸 光度A为纵坐标，绘制标准曲线。 4. 试液中铁含量的测定： 从曲线上查出试液的浓度，再计算出原试 液中Fe 2+含量。 数据处理 1. 吸收曲线的制作 波长/nm 440 460 480 490 500 510 520 530 540 560 吸光度(A) 序 号 1 2 3 4 5 6 待测1 待测2 10mg·L-1Fe2+ 标准溶液/mL 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 － － 待测液/mL － － － － － － 2.50 2.50 盐酸羟胺/mL 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 NaAc-Hac 溶液/mL 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 邻菲咯啉/mL 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 总体积/mL 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 吸光度(A) 0 2. 标准曲线的制作和铁含量的测定 从标准曲线上查得c (Fe2+) = mg·L?1 原试液c (Fe2+) = mg·L?1 722型分光光度计的使用 注意事项 1. 吸收曲线制作时应位于坐标轴的中央。 2. 蒸馏水稀释后应充分摇动。 3. 必须按照上表顺序加入试剂。 4. 移液管专管专用，无须润洗 5. 作图时，尽量使直线与X轴成45o。 问题讨论 1. Fe2+很容易被空气中的氧气氧化为Fe3+ ，会干扰 Fe2+的测定吗？实验过程中为什么要加盐酸羟胺？ 答： Fe3+ 会干扰Fe2+的测定。 Fe3+ 会与邻菲咯林生成 紫色的配合物，对Fe2+与邻菲咯林生成的红色配 合物有干扰。本实验测的是样品的总铁含量。实 验过程中加盐酸羟胺的目的是为了将待测液中可 能有的Fe3+还原为Fe2+ 。 2. 显色反应的进度与显色反应的时间密切相关。 本实验中如何保证标准系列与待测液有相同的显色时间？ 答：取8支比色管，分别编号。按表2中试剂的添 加顺序移取药品：先移取含铁的标准溶液或 待测液分别于8 支比色管中，再移取盐酸羟 胺分别于8支比色管中，依次加入其它试剂。 最后比色的顺序也与