实验1 细菌的培养方法.ppt

空气中没有营养物质，且受日光中紫外线的作用，细菌一般不能繁殖。然而，土壤中有大量的细菌存在，可随尘埃散布到空气中；寄生在人和动物呼吸道及消化道中的细菌也能通过各种途径散布到空气中，使得空气中也有一定量的细菌存在。 空气中细菌的数量和种类随地区、季节和人口密度的不同而不同。通常，可测定单位体积空气中所含细菌的数量来评价空气的污染程度。 操作二 空气中细菌的检查 沉降法是利用含有细菌的尘粒或气溶胶粒因重力作用自然下降到培养基表面，通过细菌培养，计数菌落数，粗略评估空气中细菌含量。 沉降法简单易行，缺点是不够准确。但它客观地反映了空气污染的程度和卫生通风状况，对手术室、食品业等有重要的参考意义，是判断空气污染的指标之一。 操作：将血平板打开盖，放到教室的四个角上，静止15分钟后，合上盖送37℃孵箱培养。 据推算，每100cm2培养基在空气中暴露5min，其表面接受自然沉降的细菌数约相当于10升空气中所含的细菌量。那么，暴露于空气中15min应相当于30升，所以，每m3空气中活菌数=（100 cm2培养基上菌落平均数/30）x1000 注意：计数菌落时，两个或几个菌落边缘有重叠者，均分别计算为两个或几个。 人体呼吸道与外界相通，常常有不同种类的细菌存在。其中，1/4为需氧菌，3/4为厌氧菌。这些细菌常是条件致病菌，在一般情况下并不致病。有时，正常人的呼吸道中也有致病菌的存在，如肺炎球菌、脑膜炎球菌、乙型链球菌、流感杆菌等，是引起疾病传播的一个重要因素。 由于寄居人体的关系，这些细菌对营养的要求较高，常需要用含血液成分的培养基进行分离。 操作三 呼吸道细菌的检查—咳碟试验 操作方法： 打开血平板，将平板置于口腔前约15cm处，对准培养基表面用力咳嗽3～4次，然后盖好平板盖，放置于37℃孵箱内培养24小时后观察结果。 结果判断： 平板上可有不同的菌落长出，观察菌落的形态、大小及溶血现象。 人体的皮肤表面有多种细菌存在，用水洗手或用肥皂洗手，可以除去皮肤上的污垢和灰尘，从而减少手上细菌数量，但并不能有效的杀死细菌。日常医疗、试验工作中常用的化学消毒剂如碘酒、酒精等有很好的杀菌作用，在临床医疗中广泛应用。 操作四 正常人体皮肤及随身物品的细菌检查 1、在平板底部用笔划分8个区，分别标记为①②③④⑤⑥⑦⑧。 2、用右手食指在①区上轻轻按一下，然后用肥皂洗手后，用无菌棉签拭干手指皮肤，再轻轻在②区培养基上按一下。 3、用左手食指轻轻在③区按一下，然后用棉签蘸碘酒、酒精消毒左手食指皮肤，待干后轻轻在④区按一下。 4、任取随身物品在⑤⑥⑦⑧区各按一下。 5、盖好平板，送37℃孵箱培育24小时后观察结果。 操作方法 1.细菌接种的方法有哪些？各有什么用途？ 2.厌氧菌为什么在有氧环境中不能生长？ 思考题 谢谢！ * * 无机盐的功能：① 构成有机化合物，成为菌体的成分； ② 作为酶的组成部分，维持酶的活性； ③ 参与能量的储存和转运； ④ 调节菌体内外的渗透压； ⑤ 某些元素与细菌的生长繁殖和致病作用密切相关。 某些细菌生长所必需而又不能自身合成的有机化合物。 包括维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等。少数细菌还需特殊的生长因子，如流感嗜血杆菌需要X、Ⅴ两种因子，X因子是高铁血红素，Ⅴ因子是辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ，两者为细菌呼吸所必需。 * ? * 如疱肉培养基：加入肉渣（含有不饱和脂肪酸和谷胱甘肽等还原物质）。或者在培养基中加入硫乙醇酸盐和半胱氨酸等较强的还原剂 * SS培养基中含有胆盐、煌绿、枸橼酸，可以抑制革兰阳性球菌和部分革兰阴性菌的生长， 而对沙门菌和志贺菌没有影响。 如疱肉培养基：加入肉渣（含有不饱和脂肪酸和谷胱甘肽等还原物质） * * * * 专性需氧菌：结核分支杆菌 大气中的氧气浓度为21％ 兼性厌氧菌： 微需氧菌：空肠弯曲菌 专性厌氧菌 空气的成分其积极分数：氮气（78%）、氧气（21%）、稀有气体（0.94%）、二氧化碳（0.03%）、其它气体和杂质（0.03%）。 一区划线十分之一左右 手腕用力 * 30 到40度角 * * 克雷伯菌形成粘液状菌落 变形杆菌形成迁徙生长现象 * 氯化三苯四氮唑（TTC） ：四唑盐TTC是无色可溶性化学物，当细菌生长时，进入菌体细胞内，在酶催化的部位被还原，释放出不溶解的红色色素甲，故红色仅在细菌生长的培养基区域内形成 * * 链球菌呈沉淀生长；专性需氧菌如枯草杆菌则在液体表面生长形成菌膜。 * * * * * * 人体内也有大量的微生物，按重量计算：人体携带的微生物总重量约为1271g，其中肠道占1000g，肺：20g，口腔占20g，鼻占10g，眼1g，阴道29g，皮肤200g，