生物化学第二章2课件.pptVIP

第六节　蛋白质的重要性质 一、蛋白质两性解离性质和等电点 二、蛋白质胶体性质 三、蛋白质的沉淀 四、蛋白质变性与复性 五、蛋白质主要呈色反应 双缩脲反应 蛋白质的紫外吸收光谱 核糖核酸酶变性与复性作用 Native ribonuclease Denative reduced ribonuclease Native ribonuclease 8 M urea and ?-mercapotoethanol Dialysis 变性 复性 别构效应：一些蛋白质由于受某些因素的影响，其一级结构不变而空间结构发生变化，导致其生物功能的改变，称为蛋白质的变构现象或别构现象。变构现象是蛋白质表现其生物功能的一种普遍而十分重要的现象，也是调节蛋白质生物功能的极为有效的方式。 一个亚基的变构作用，促进另一亚基变构的现象，称为亚基间的协同效应。 血红蛋白输氧功能和构象变化 O2 Hb Hb- O2 O2 血红蛋白和肌红蛋白的氧合曲线 活动肌肉毛细血管中的PO2 0 20 40 60 80 100 肺泡中的PO2 肌红蛋白 血红蛋白 氧分压 氧饱和度 13.33kPa 2.67kPa 一、 两性解离性质及等电点 二、 蛋白质胶体性质 三、 蛋白质的沉淀 四、 蛋白质的变性与复性 五、 蛋白质的紫外吸收特性 六、 蛋白质呈色反应 pH = pI 净电荷=0 pH pI 净电荷为正 pH pI 净电荷为负 Pr COOH NH3+ + H+ + OH- + H+ + OH- Pr COO- NH2 Pr COO- NH3+ 当蛋白质溶液在某一定pH值时，使某特定蛋白质分子上所带正负电荷相等，成为两性离子，在电场中既不向阳极也不向阴极移动，此时溶液的pH值即为该蛋白质的等电点 （isoelectric point，pI）。 由于不同蛋白质的氨基酸组成不同，所以都有其特定的等电点，在同一pH 条件下所带净电荷不同。如果蛋白质中碱性氨基酸较多，则等电点偏碱，如果酸性氨基酸较多，等电点偏酸。酸碱氨基酸比例相近的蛋白质其等电点大多为中性偏酸，约在5.0左右。 由于各种蛋白质的等电点不同，所以在同一pH 溶液中带电荷不同，在电场中移动的方向和速度也各不相同，根据此原理就可利用电泳的方法将混合的各种蛋白质分离开。 由于蛋白质分子量很大，在水溶液中形成1-100nm的颗粒，因而具有胶体溶液的特征。可溶性蛋白质分子表面分布着大量极性氨基酸残基，对水有很高的亲和性，通过水合作用在蛋白质颗粒外面形成一层水化层，同时这些颗粒带有电荷，因而蛋白质溶液是相当稳定的亲水胶体。 3、 β－转角（β-turn） 特征：多肽链中氨基酸残基n的羰基上的氧与残基（n+3）的氮原上的氢之间形成氢键，肽键回折1800 。 β-转角都在蛋白质分子的表面。 无规卷曲常出现在a-螺旋与a-螺旋、a-螺旋与β-折叠、 β-折叠与β-折叠之间。它是形成蛋白质三级结构所必需的。 又称自由卷曲，是指没有一定规律的松散肽链结构。酶的功能部位常常处于这种构象区域。 4、无规则卷曲（non-regular coil） 无规则卷曲示意图 无规则卷曲 细胞色素C的三级结构 四、 蛋白质的超二级结构和结构域 　　蛋白质中相邻的二级结构单位（即单个α－螺旋或β－折叠或β－转角）组合在一起，形成有规则的、在空间上能辩认的二级结构组合体称为蛋白质的超二级结构 　　基本组合方式：αα；β×β；βββ (１)超二级结构的定义（ supersecondary structure ） 4.1 超二级结构 （2） 类型 ??-由两股或三股右手螺旋缭绕而成的左手螺旋 ??-由两股?折叠片，中间加入?螺旋而形成的片层结构 ???-由三条或更多的反平行式?-链通过?-转角或其它的肽段连接而成的结构 A．??；B ? X ?； C ? ? ?； D ?-曲折； E. 回形拓扑结构 　　在二级结构的基础上，多肽链进一步卷曲折叠成几个相对独立、近似球形的三维实体，再由两个或两个以上这样的三维实体缔合成三级结构，这种相对独立的三维实体称为结构域。 形成意义： ?动力学上更为合理 ?蛋白质（酶）活性部位往往位于结构域之间，使其更 具柔性 4.2 结构域（structure domain） （1）结构域的定义 卵溶菌酶的三级结构中的两个结构域 ?-螺旋 ?-转角 ?-折叠 二硫键 结构域1 结构域2 （2）特点 A 结构域之间有