食品毒理学 第六章课件.pptVIP

根据碱基置换产生的后果不同（即对多肽链上氨基 酸序列产生的影响不同），又可分为： 同义突变 错义突变 无义突变 终止密码突变 同义突变：当三联密码子中的一个碱基被另一个碱基置换后，密码子的意义没有改变，在合成多肽链时仍插入相同的氨基酸，即虽有碱基的改变，但不伴随氨基酸的变化，此种变化成为同义突变。 一个氨基酸一般有2～6个密码子，丝氨酸有4个。 无义突变：由于碱基置换，使mRNA上的一个密码子变成终止密码子（无义密码子），若这个密码子出现在基因中间，就不能继续为氨基酸编码，使翻译过程到此终止，肽链的延长提前结束。 终止密码子：UAG，UAA，UGA 终止密码突变：碱基置换使mRNA上的终止密码子变成一个氨基酸密码子，其结果是使合成的肽链延长到第二个终止密码时才结束。 终止密码子：UAG，UAA，UGA 非整倍性和多倍体的产生是由于染色体分离异常所至 非整倍体是由于正常细胞未分裂而产生的。原因是由于细胞在第一次减数分裂时同源染色体不分离，或在第二次减数分裂或有丝分裂过程中，姐妹染色单体不分离而形成。 2. 多倍体涉及整个染色体组。在有丝分裂过程中，若染色体己正常复制，但由于纺锤体受损，染色单体不能分离到子细胞中，这时染色体数目就会加倍，形成四倍体。减数分裂的异常也可使配子形成二倍体，若二倍体的配子受精，可形成多倍体的受精卵。 致突变试验中的一些问题 1.阴性、阳性对照组的设立 ①阴性对照：即未处理对照或溶剂对照。 目的：获得试验的基础数据。 ②阳性对照：是用某种已知能产生阳性反应的物质作对照。 目的： *通过对阳性物质的试验证明实验方法的可靠； *验证实验者在本实验条件下，完成技术和鉴定致突 变物的能力； *证实经一定时间后，本实验的重复性。 2. 体外试验的活化系统 前致突变物：本身不具致突变性，经哺乳动物代谢才转化成致突变物的化学物质。 ①哺乳动物细胞介导 使用完整的细胞，特别是大鼠肝原代细胞，与测试细菌或细胞一起培养。 ②S9 经酶诱导剂处理后制备的肝匀浆，再经9000g离心分离所得上清液，加上适当的缓冲液和辅助因子。 ③纯化酶和基因工程 纯化酶：纯化的细胞色素P450、谷光苷肽转移酶、过氧化物酶。 基因工程：将人的细胞色素P450基因插入组合细胞内，再进行致突变试验，使细胞具有代谢活化系统。 显性致死试验 显性致死试验：使雄性大鼠或小鼠接着受试物，然后使之与未接着该物质的雌性大鼠或小鼠交配，观察胚胎死亡情况。 精子畸形试验 已知精子畸形是决定精子形成的基因发生突变的结果。常染色体和Y-性连锁基因突变及某些染色体重排，如性-常染色体易位，也可使精子发生畸形。小鼠精子畸形试验能评价受试物对精子生成、发育的影响，可检测受试物在体内对生殖细胞的遗传毒性作用。 非程序性DNA合成试验 　　 正常情况下，于细胞有丝分裂周期中，仅S期是DNA合成期。当DNA受损伤时，损伤修复的DNA合成主要在其他细胞周期，称程序外DNA合成，即UDS，因此发现UDS增高，即表明DNA发生过损伤。　　 小鼠特异基因座试验 特异基因座试验(SLT)是利用两种品系的小鼠，一种为T型，其有几个与毛色、眼色和耳型有关的隐性突变基因的纯合子；另一种为3H1或C57BL系，不具有这些基因的野生型，使后一种小鼠接触受试物，使之与T系交配。如果受试物未能使相应位点发生突变，则杂交一代为杂合子，T系的隐性基因不能表达，如果发生了突变，则相应的隐性基因可于出生时或断乳时表达。 三、非整倍体与多倍体 第二节 化学毒物致突变作用的机制及后果 DNA损伤 细胞分裂过程的改变 突变的后果 DNA合成修复酶系的作用 1、碱基损伤 一、DNA损伤 1、碱基损伤 一、DNA损伤 烷化剂是指化学性质活泼，能提供烷基使蛋白质和DNA等大分子物质发生烷基化的一类化合物。 烷化剂种类很多，如硫芥，氮芥，环氧乙烷等。 烷化剂引起基因突变的机制较复杂，既可引起碱基置换，又可引起移码突变，其致突变性很强。 烷化剂引起突变的主要方式： 1. 改变碱基配对的专一性（碱基改造剂作用） 2. 引起 DNA 脱嘌呤 平面大分子嵌入DNA链 有些大分子能以静电吸附形式嵌入DNA单链的碱基之间或DNA双螺旋结构的相邻多核苷酸链之间，称为嵌入剂。 平面大分子嵌入DNA链造成移码突变。 一、DNA损伤 1、碱基损伤 嵌入物：具有嵌入 DNA 双螺