血型鉴定与交叉合血血型鉴定交叉合血与交叉合血.ppt

血型的定义及分类 血型是指各种血液成分的遗传多态性标记。血型抗原不仅存在于红细胞上,也存在于白细胞和血小板上，还存在于各种组织细胞、多数体液中，甚至不同个体的血清蛋白间也存在型别的差异。 血型系统主要分类： 1.红细胞血型系统，其中又分为ABO血型系统、Rh血型系统、MNS血型系统、P血型系统、Kell血型系统、Kidd血型系统、Duffy血型系统 2.人类主要组织相容性抗原系统（HLA) 3.血小板血型系统（PHA） 4.血清型。血清型按蛋白质可分为免疫球蛋白、血清酶、血清蛋白、补体等几大类。 血型鉴定 血型鉴定主要用已知特异性的抗体鉴定未知的红细胞抗原，或辅助用已知抗原的一组红细胞（谱红细胞）鉴定未知血清的抗体，结合相关理论基础综合判断血型。血型鉴定以抗原、抗体免疫检测技术为基础，常用的方法有盐水介质法、微柱凝胶卡片法、聚凝胺法，疑难血型还可用聚合酶链反应（PCR）技术直接分析相关血型的基因。 1.1 ABO血型鉴定 实验原理： 根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞上有无相应A抗原或/和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。 试剂和材料?： 1) 抗-A(B型血)、抗-B(A型血)及抗-A+B(O型血）分型血清，购置商品试剂。? 2) 5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。 ? 3) 受检者血清。? 4) 受检者5％红细胞盐水悬液。 ABO血型鉴定的检测方法 1.试管法? （1）取洁净小试管（内径10mm×60mm)3支，分别标明抗-A、抗-B 、抗-A+B,用滴管分别加抗-A、抗-B 、抗-A+B分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 （ 2）另取洁净小试管（内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B、O细胞,用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再以滴管分别加入5％ A、B、O试剂红细胞盐水悬液1滴，混和。 ? （3)?立即以1000r／min离心lmin. （4）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 （5)?观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 ? ? 4＋ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。? 3＋? 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。 ? 2＋? 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细?胞。 1＋? 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞? 土? 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞? MF ? 混合凝集外观(mixed?field)是指镜下可见少 数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。? 一 ?表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。? ? 2.玻片法? （1)?取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B、抗A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B、抗-A+B分型血清1滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。? （ 2)?另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。 （ 3)?将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与红细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。玻片作试验时，也应用低倍镜观察结果。 4）结果判定? ABO血型正反定型结果? 注释：十为凝集；一为不凝集。 分型血清+受检者RBC? 受检者血型 受检者血清+试剂RBC 抗-A? 抗-B? 抗-A十B? ? A细胞 B细胞 O细胞 十? ─? 十? A? ─? 十? ─? ─?