抗生素类药物的分析幻灯片.pptVIP

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第十章 抗生素类药物的分析 第二节 β-内酰胺类抗生素的分析 二、鉴别实验 抗生素按骈和环可以分为青霉素(骈和五元氢化噻唑环)、头孢菌素(骈和六元氢化噻嗪环)及碳青霉烯类三类。 青霉素类 头孢菌素类 碳青霉烯类 鉴别实验 (一)、呈色反应 (二)、各种盐的反应 (三)、光谱法 (四)、色谱法 1、呈色反应——羟肟酸铁反应 例如 头孢哌酮——红棕色 氨苄西林——紫红色 头孢氨苄——红色~褐色 头孢噻吩钠——红褐色 普罗卡因青霉素——紫红色 等等。 采用羟肟酸铁反应可以直接快速初步区分出大部分β-内酰胺类抗生素与其它药物,且根据颜色差异快速区分出青霉素类和头孢菌素类药物。 2、呈色反应——类似肽键的反应 (1)—CONH— 似肽键结构 (2)一些取代基有a-氨基结构,可发生茚三酮反应显示蓝紫色;与斐林试剂作用,产生双缩脲反应,开环分解,使碱性酒石酸铜盐还原显紫色。 (3)例如头孢拉定、头孢羟羟氨苄。 3、其他呈色反应 (1)与重氮苯磺酸反应——头孢菌素族7位侧链含酚羟基时,能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应,显橙黄色。 例 头孢哌酮 (2)与变色酸-硫酸反应——青霉素类药物的结构中有活泼亚甲基的,则经硫酸加热分解生成的甲醛与变色酸反应而呈色。 例 阿莫西林加变色酸-硫酸试剂混合后,于150℃加热2~3min,因分离出甲醛与变色酸缩合而成深褐色。 (3)与铜盐呈色——头孢氨苄加醋酸、硫酸铜、氢氧化钠试液后,生成铜配位盐,显橄榄绿色。 二、各种盐的反应 青霉素类和头孢素类药物多制成钠盐或钾盐使用,因而可利用钾离子、钠离子的焰色反应进行鉴别。 钠的焰色反应——黄色 钾透过蓝色钴玻璃——紫色 注:用洁净的铂丝蘸取需要的物质(固体或液体都可),放在无色火焰上观察。 光谱法 1、红外光谱法 用阿莫西林举例说明红外光谱法鉴别。 阿莫西林基本信息 阿莫西林(Amoxicillin),又译安莫西林或安默西林,本名羟氨苄青霉素,是一种最常用的广谱β-内酰胺类抗生素。 结构 阿莫西林的红外光谱法 红外光谱法又称为“红外分光光度法”,利用物质对红外光区的电磁辐射的选择性吸收来进行结构分析及各种红外光的化合物的定性和定量分析的一法。被测物质的分子在红外线照射下,只吸收与其分子振动,转动频率相一致的红外光谱,对红外光谱进行剖析,可对物质进行定性分析,化合物分子中存在着许多原子团,各原子团被激发后,都会产生特征振动,其振动频率也必然反映在红外吸收光谱上,据次可鉴定化合物中各原子团,也可进行定量分析。 2、紫外光谱法 通常是利用最大吸收波长进行鉴别。 例如将阿莫西林配成适当浓度的水溶液,进行紫外分光光度法检测,就可以根据其吸收光谱的最大吸收波长进行鉴别。 四、色谱法 主要包括薄层色谱法和高效液相色谱法。 利用比较供试品与对照品主峰的保留时间tR(HPLC法)或斑点比移值Rf(TLC法)是否一致进行鉴别。 关于β-内酰胺类抗生素的测定方法,除微生物效价测定法外,理化方法中常用碘量法、分光光度法、极谱法等. 随着仪器分析的不断发展,色谱法在β-内酰胺类抗生素的测定中占据了越来越重要的地位.毛细管电泳、高效液相色谱、高效液相色谱-质谱联用等新技术越来越广泛的应用于此类药物的测定. 目前高效液相色谱法测定单组份该类药物的报道很多,中国药典(2000版)、美国药典(24版)、英国药典(1998版)上对β-内酰胺类抗生素含量测定及有关物质的检查大多采用了反相高效液相色谱法或薄层法.而应用高效液相色谱法同时测定生物样品中多种β-内酰胺类抗生素是目前分析工作者一直研究课题。 * * *

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