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梅毒螺旋体三种血清学实验方的比较梅毒螺旋体三种血清学实验方法的比较梅毒螺旋体三种血清学实验方法的比较梅毒螺旋体三种血清学实验方法的比较
梅毒螺旋体三种血清学实验方法的比较
摘要 目的:比较三种血清梅毒抗体检测方法的性能及检测价值。因明胶颗粒凝集试验(TPPA)是公认的最佳梅毒确认方法,所以我们以TPPA方法作为参照,进行比较。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)作同步检测,用明胶颗粒凝集试验(TPPA)作参照对比。结果:45例标本,以TPPA作为参照,ELISA法假阳性仅1例,TRUST法假阳性有5例,另有假阴性6例。结论:ELISA法检测血清中梅毒抗体灵敏度和特异性均明显高于TRUST,与TPPA法无显著差异,但两种方法各有其优点,在方法学上呈互补性,将两种方法结合更有利于提高检测的敏感性和特异性。
关键词 梅毒抗体;甲苯胺红不加热血清试验(TRUST);酶联免疫吸附试验(ELISA);明胶颗粒凝集试验(TPPA)。
材料和方法:
标本来源:我院2009—2010年门诊疑为梅毒的患者标本
45例,年龄在24—68岁之间,平均46岁,其中女性12例,男性33例。
1.2 试剂:TRUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供;ELISA试剂盒为北京万泰生物药业股份有限公司产品;TPPA试剂盒为日本富士株式会社产品。
1.3 实验方法:采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同步进行检测,以明胶颗粒凝集试验(TPPA)作参照。
甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)是由心磷脂+胆固醇+卵磷脂组成的复合抗原,吸附于甲苯胺红上,检测血清中非特异性抗体。使用试剂,用旋转仪振摇,室温保持20—24,每分钟转摇100次,8分钟观察结果。TRUST试验是一种非特异性血清试验。
酶联免疫吸附试验(ELISA)为双抗原夹心法,使用试剂,比色用全自动酶标仪比色。ELISA法检测梅毒螺旋体是将基因重组表达的梅毒膜特异性抗原包被在微孔板上,用双抗原夹心法测定梅毒特异性抗体,主要检测梅毒螺旋体IgG和IgM抗体。
梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)是将特异性梅毒螺旋体抗原包被在明胶颗粒上,与血清中特异性抗体结合后出现肉眼可见的凝集反应的检测方法。
2.结果:采用ELISA试验和TRUST试验同时进行检测,阳性结果均用TPPA试验进行确定,下表是两种方法检验结果的比较。
两种方法检验结果的比较
45例标本,经TPPA试验以及临床初诊为44例,TRUST法结果为15例阳性,30例为阴性;ELISA法结果为20例阳性,25例为阴性。30例TRUST阴性标本中有5例为假阴性;15例TRUST阳性标本中有5例为假阳性。以TPPA检测结果为标准,25例ELISA阴性标本其TPPA法结果仍为阴性。20例ELISA阳性标本其TPPA检测结果为19例,1例为假阳性。45例标本,TRUST法假阳性5例,假阴性5例。TRUST法敏感性和特异性分别为75%和85.7%,ELISA法敏感性和特异性分别为100%和96.1%。ELISA法与TPPA法检测结果之间无显著差异。
3.讨论:
梅毒螺旋体(Treponema pallidum .TP)
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