方法的验证.ppt

7）定量限（Limit of Quantitative, LOQ或QL） 定义：定量限系指供试品中被测成分能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定定量限。 推荐测定法： -以信噪比10:1时的浓度(或量)进样测定,重复测定的响应值应满足精密度要求。 8）耐用性 定义：耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。可用于说明正常使用时的可靠性。 1.典型的变动因素有：被测溶液的稳定性,样品提取次数，时间等。 8）耐用性--考察因素 2.HPLC法中典型的变动因素： 流动相pH值变化的影响； 流动相组分变化的影响； 不同色谱柱(不同的批号和／或供应商)； 柱温； 流速。 8）耐用性--考察因素 3.GC法中典型的影响因素： 不同色谱柱(不同的批号和／或供应商)； 柱温 流速 固定相 不同类型的载体 8）耐用性--考察因素 4?溶液的稳定性研究 溶液的稳定性研究用来证明根据相应方法制备的样品溶液和标准品溶液在规定的储存条件下在一定时间内保持稳定。如果方法中没有规定有效期，样品溶液和标准品溶液需进行稳定性研究。 测定结果与初始结果进行比较，符合接受标准便可确认样品溶液和标准品溶液在规定的储存条件下在规定储存时间是稳定的。 * 二、分析方法验证6、验证接受标准（含量-HPLC,GC,UV） 验证内容 接受标准 精密度/重复性? RSD≤2.0%，n≥6 中间精密度 RSD≤2.0%，n≥4 专属性 色谱法：色谱峰分离，无干扰 线性? --相关系数? --截距 ?--剩余标准差 r?≥0.998? ≤2.0% ≤2.0% 范围 至少标示量（100%?溶液）的80?-120%? 准确度? --平均回收率? --回收率的RSD 98.0?-102.0%?(n=9，3个浓度，每个浓度三份样品）≤2.0%(n?≥9，至少3个浓度，每个浓度测3次) 稳定性?-样品溶液?-对照溶液 规定时间内变化≤2.0%? 耐用性 系统适用性实验通过? 需验证项目 注意：“否” 表示通常不需要做的项目： “是”表示通常需要做的项目。 ①假如已做了重现性，就不需再做中间精密度； ②分析方法缺乏专属性，可以由其他分析方法来补充； ③视具体情况予以验证，有些情况下可能需要。 项目内容 鉴别 杂质测定 含量测定 定量 限度 准确度 否 是 否 是 精密度 重复性 否 是 否 是 中间精密度 否 是① 否 是① 专属性② 是 是 是 是 检测限 否 是③ 是 否 定量限 否 是 否 否 线性 否 是 否 是 范围 否 是 否 是 耐用性 是 是 是 是 三、分析方法验证常见问题 样品的选择问题 供试品溶液制备考察不全面 对照品溶液浓度与供试品不匹配 标准曲线的制备 样品测定不在线性范围之内取样、范围太小、单位等问题 色谱条件的选择 应详述理由并附相关图谱 方法改变后应与原方法作比较 对照品溶液的制备 对照品称量难以达到精密称定的要求 回收率测定问题 * 谢谢！ * * 分析方法的验证 * 内容： 　 一、介绍 二、分析方法验证 三、常见问题 * 　一、介绍 方法分析：是为完成检验项目而设定和建立的测试方法，它详细描述每一个分析试验所必须的步骤。 一般包括分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、供试品溶液与对照品溶液等的制备、测定、计算公式及限度要求等。 　一、介绍分析方法确认或验证相关指南 机构或组织 文件名称 美国药典（USP） 1225Validation of compendial procedures方法验证 1226Verification of compendial procedures方法确认 人用药品注册技术要求国际协调会（ICH） Q2（R1）Validation of Analyt8ical Procedures Q2（R1）分析方法验证 《中国药典》2010年版 一部附录“中药质量标准分析方法验证指导原则” 二部附录“药品质量标准分析方法验证指导原则” 。 * 　二、分析方法验证 1、方法验证的定义：是根据检测项目的要求，预先设置一定的验证内容和验证标准要求，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法能否符合检测项目的要求。 2、分析方法验证的目的： 是判断采用的分析方法是科学、合理，是否能控制产品的内在质量，证明分析方法适合相应检测要求。 二、分析方法验证 3、分析方法验证范围 1.采用新的检验方法； 2.检验方法需变更的； 3.采用《中华人民共和国药典》及其他法定标准未收载的检验方法； 4.法规规定的其他需要验证的检验