血液一般检验课稿.ppt

第二章 血液一般检验 第一节 红细胞检验 红细胞（red blood cell ；erythrocyte）起源于骨髓造血干细胞（colony forming unit-spleen，CFU-S） 红细胞的主要生理功能：通过胞内的血红蛋白来实现的。 红细胞计数(red blood cell count，RBC) 【检测原理】 1．手工显微镜法 2．血液分析仪法 利用电阻抗和（或）光散射原理 【方法学评价】 1．手工显微镜法 2．血液分析仪法 为目前主要临床检验细胞计数方法 变异系数（coefficient of variation, CV ）小。 【质量控制】 1．手工法 误差来源包括：标本、操作、器材、固有误差（计数域误差） 2．仪器法 严格按操作规程；定期作室内和室间质控。 【临床意义】 1．生理性变化 (1)年龄与性别的差异 (2)精神因素 (3)剧烈体力运动和劳动 (4)气压降低 (5)妊娠中、后期 2．病理性变化 （1）红细胞和血红蛋白量减少：在临床最常见于各种原因的贫血。 1）急性、慢性红细胞丢失过多：如各种原因的出血。 2）红细胞寿命缩短：如各种原因的溶血 3）造血原料不足 4）骨髓造血功能减退 （2）红细胞增多 1）原发性红细胞增多：见于真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。 2）继发性红细胞增多：常见于可以引起低氧血症的疾病：心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病。 肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可能与皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有关、药物肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。 (3）相对性红细胞增多 二、血红蛋白(hemoglobin, Hb或HGB)测定 （一）血红蛋白分子结构及成分 色素：亚铁血红素 原卟啉和铁原子组成的一种结合物 蛋白质：珠蛋白 血红蛋白的结构construction of hemoglobin 卟啉 卟啉 Fe 卟啉 卟啉 珠蛋白 珠蛋白具有种属特异性，含有两条α链和两条非α链 正常成人的Hb包括： HbA α2β2 （90%以上） HbA2 α2δ2 （2 ~ 3%） HbF α2γ2 （2%以下；新生儿占70%） 血红蛋白的代谢 珠蛋白 氨基酸 血红素 胆色素（胆绿素、胆红素、 胆素原及胆素） 【检测原理】 血红蛋白形式： 氧合血红蛋白（oxyhemoglobin） 碳氧血红蛋白（carboxyhemoglobin） 高铁血红蛋白（hemiglobin，Hi） 其他衍生物 1．氰化高铁血红蛋白（hemiglobincyanide, HiCN ）测定法 吸收波峰：540nm ?2．其他测定法： 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS-Hb）（次选方法） 叠氮高铁血红蛋白法（hemiglobin azide,HiN3） 碱羟血红蛋白测定法 【方法学评价】 1966年，ICSH氰化高铁血红蛋白测定法作为国际标准参考方法。 HiCN法简便、显色快而稳定。可检测除硫化血红蛋白（sulphon hemoglobin, SHb ）外的各种血红蛋白。 氰化钾（potassium cyanide，KCN）有剧毒 十二烷基硫酸钠血红蛋白（sodium dodecyl sulfate, SDS）测定法：除SHb外，血液中各种Hb均可与低浓度SDS作用，生成SDS-Hb棕红色化合物。吸收曲线波峰在538nm，波谷在500nm，肩峰在560nm。无公害。破坏白细胞，不适于同时用于有白细胞计数和Hb测定的血细胞分析仪上使用。 三、红细胞形态检查 【方法学评价】 虽然血细胞分析仪广泛用于全血细胞计数，但观察血涂片可用于估计相应血细胞数量，因而显微镜细胞数量和形态的观察现常作为对仪器分析质控的参考对照。 注意：如果血片制作不良和染色不佳，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。 【质量控制】 选择细胞分布均匀的区域： 红细胞堆积棒状穿钱状：细胞过于密集但如果在血涂片较薄的区域出现：可能是红细胞外附有异型球 蛋白? 注意完整的检查 顺序 观察红细胞 observe erythrocyte 色素colour 大小size 形态