1.2.1基因工程的基本操作程序.ppt

2、将目的基因导入动物细胞---显微注射法 3、将目的基因导入微生物细胞 （1）原核生物特点： 单细胞、遗传物质少、繁殖快 （2）方法步骤： 用Ca2+处理细胞得到感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 四.目的基因的检测与鉴定： 步　骤 检测内容 方　法 标记基因筛选 筛选出含目的基因的细胞 利用标记基因进行筛选 分 子 检 测 第一步　 转基因生物的DNA上是否 插入了_________ DNA分子杂交技术(DNA和DNA之间) 第二步　 目的基因是否转录出了 _____ 分子杂交技术(DNA和mRNA之间) 第三步　 目的基因是否翻译成 _______ 抗原—抗体杂交技术　 个体生物学 水平鉴定 抗虫或抗病接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度 目的基因 mRNA 蛋白质 1、利用标志基因进行筛选的原理与方法 为了检测重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是_________________ __________，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是_______________。 能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素 pBR322质粒 2、DNA分子杂交的原理与方法 变性 2.(2015·威海模拟)科学家将人的生长激素基因与某种细菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子进行重组，并成功地在该细菌中得以表达(如下图)。请据图分析回答： (1)过程①所示获取目的基因的方法是　　　　　　　　　　　。 (2)细菌是理想的受体细胞，这是因为它　　　　　　　　　。 (3)质粒A与目的基因结合时，首先需要用　　　　　　　　　　酶将质粒切开“缺口”，然后用　　　　　　　　　　酶将质粒与目的基因“缝合”起来。 逆转录法(反转录法) 繁殖快、单细胞、遗传物质较少 限制性核酸内切　 DNA连接 (4)若将细菌B先接种在含有　　 　　的培养基上能生长，说明该细菌中已经导入外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因；若将细菌B再重新接种在含有　　　 　的培养基上不能生长，则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒。 (5)检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA和是否翻译出生长激素，可采用的技术分别是　　　 　、　　　　　　。 氨苄青霉素　 四环素 核酸分子杂交　抗原—抗体杂交 4.(2015·唐山模拟)基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答问题： (1)图中A是　　　　　　　。 (2)在上述基因工程的操作过程中，可以遵循碱基互补配对原则的 步骤有　　　　　　　(用图解中序号表示)。 (3)不同种生物之间的基因移植成功，从分子水平分析，进行基因 工程的主要理论依据是不同生物的DNA结构的基本形式　　　　 (填相同、不相同) ，也说明了生物共用一套　　　　　。 载体　 ①②④ 相同　 遗传密码子 (4)研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作 用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶 抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉 米这种变异的来源是　　　　　　　。 基因重组　 (5)科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的 方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的 植株具备了抗病性，这说明目的基因(抗枯萎病的基因)已　　　。 如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中___________ (填“一定”或“不一定”)含有抗病基因。 表达　 不一定 【解析】(1)图中A是运载目的基因的载体。 (2)基因工程的操作步骤包括获取目的基因，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。只有将目的基因导入受体细胞过程不遵循碱基互补配对原则。 (3)基因工程的操作基础是不同生物的DNA结构基本形式相同，且共用一套遗传密码子。 (4)基因工程又称DNA重组技术，其变异原理为基因重组。 (5)如果把抗枯萎病的基因导入叶绿体DNA中，将来产生的雌配子中可能含有抗病基因，雄配子中不含抗病基因。 【考题回访】 1.(2015·石家庄模拟)据图表回答问题： (1)假设所用的限制酶均能将所识别的位点完全切开，采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切含有目的基因的DNA，能得到　　　　种