九层塔萃取物对小鼠黑色素瘤细胞分泌黑色素产量的影响-建国科技大学.doc

九層塔萃取物對小鼠黑色素瘤細胞分泌黑色素產量的影響 高而仕1, 黃俊銘2* 建國科技大學美容系 中山醫學大學應用化學系 摘要 九層塔又可稱為羅勒，學名為Ocimum basilicum，是一種脣形科的植物，多數種類為一年生，亦有多年生的品種。台灣地區種植廣泛，為常見的香料植物。由於許多台灣本土的菜餚中使用大量的九層塔，例如：九層塔炒蛋。因使有可能使食用者在當下攝取大量的九層塔，因此坊間開始盛傳攝取過量的九層塔可能導致肝癌或是使皮膚變黑等未經證實的謠傳。由於九層塔屬唇形科植物，而脣形科植物往往具有大量的類黃酮成分，此成分具有強大的抗自由基、抗病毒、抗氧化、抗發炎與抗肝癌的功效，因此攝取九層塔會導致肝癌則是完全沒有學理根據的謠言，事實上，攝取適量的唇形科植物反而具有保肝的功效。九層塔的水萃取物經過我們的實驗測試，結果發現在具有高達10000ppm濃度的九層塔水萃取物的環境下，小鼠黑色素細胞的存活率與黑色素產量並不會被影響。根據此濃度與人體體重的換算，一個體重60kg的成人，九層塔攝取量高達600克/日也不會對於人體的黑色素有增加的作用。根據(行政院衛生署食品資訊網的成人均衡飲食建議量，2010)，毎餐綠色蔬菜建議攝取三個種類，毎種類約100公克，所以食物的攝取應注意多來源性，避免過度集中攝取某一種類的食物來源，才可以確保均衡的營養攝取與健康管理。總合以上的實驗結果與飲食健康管理的正確觀念，可以放心的攝取九層塔所烹製的菜餚，而不需要擔心對於膚色變的黝黑，而九層塔的營養成分很多，植株又富含類黃酮等抗氧化成分，對於人體健康有正向的幫助。 關鍵詞：九層塔、黑色素、類黃酮 壹、研究背景 九層塔是ㄧ種常見的香料植物，台灣民間盛傳多吃九層塔會造成皮膚黝黑，但是實際上卻沒有相關的實例報告。此外就營養學的角度而言，攝取適量的九層塔可以當作營養的來源，而攝取過量是否會對人體的黑色素有增加的作用尚未有科學證據的支持。因此本研究採用B16-F10（小鼠黑色素瘤細胞）為實驗對象，將預先經冷凍乾燥後的九層塔萃取物按日常飲食所攝取的劑量範圍，對於B16-F10細胞進行試驗，並偵測黑色素瘤細胞的存活率與黑色素產量的測定，藉此評估經由飲食中所攝取的九層塔是否具有改變皮膚顏色的能力。 九層塔又可稱為羅勒，學名：Ocimum basilicum，是一種脣形科的植物，多數種類為一年生，亦有多年生的品種。台灣地區種植廣泛，為常見的香料植物。由於許多台灣本土的菜餚中使用大量的九層塔，例如：九層塔炒蛋。因使有可能使食用者在當下攝取大量的九層塔，因此坊間開始盛傳攝取過量的九層塔可能導致肝癌或是使皮膚變黑等未經證實的謠傳。由於九層塔屬脣形科植物，而脣形科植物往往具有大量的類黃酮成分，此成分具有強大的抗自由基、抗病毒、抗氧化、抗發炎與抗肝癌的功效(鄭珮妏，2003)，因此攝取大量的九層塔會導致肝癌則是完全沒有學理根據的謠言，事實上，攝取適量的唇形科植物反而具有保肝的功效。而本實驗，則欲著力研究九層萃取物對於黑色素的增生是否有顯著的影響，選用B16-F10（小鼠黑色素瘤細胞）為研究對象，因為小鼠黑素素瘤細胞的生長迅速，培養容易，此外對於黑色素的產量多，容易觀察，因此設計以下實驗，以便進行九層塔對於黑色素細胞產量的影響。 貳、研究方法 一、小鼠黑色素瘤細胞的培養 小鼠黑色素瘤細胞(B16-F10)的培養方法(Yuto Kamei，2009)主要是將B16-F10細胞培養在DMEM培養基(Dulbecco’s minimum essential medium)，此培養基另外添加的成分含有10% fetal calf serum (胎牛血清)，2 mM 麩醯胺酸(Glutamine)，1% 非必需胺基酸(Non Essential Amino Acids)與1% 抗生素(100 units/ml of penicillin 與100 μg/ml of streptomycin)，細胞培養箱控制在5 % CO2，37 ℃恒溫的環境，實驗所需的細胞培養密度維持在2×105 ~ 1×106 cells/ml，每2~3天更換培養基一次，或進行繼代培養。 九層塔水萃取物的製備 購買無農藥之新鮮九層塔莖葉部份，清洗後置入研磨機內與少許碎冰一起研磨使其均質化，經簡單過濾後，將其汁液冷凍後，使用冷凍乾燥機減壓乾燥，再將取得的乾燥物研製成粉末狀密封保存於- 4 ℃乾燥環境。 圖1：九層塔可食用的莖與葉 黑色素瘤細胞存活率測試 細胞存活率測試主要是採用MTT試劑測定法(黃俊銘，2005)所進行。秤取適量九層塔水萃物的粉末，溶解於DMEM培養基而製備成0、50、100、500、1500、2000、5000、10000 ppm等濃度後滅菌處理備用。將事先培養