嗜酸性粒细胞计数P36.ppt

嗜酸性粒细胞计数P36 临床检验基础教研室 程杨艳 嗜酸粒细胞起源于骨髓多能造血干细胞，为髓系干细胞分化而来的嗜酸粒细胞祖细胞（CFU-EO）所产生。 功能： （1）微弱的吞噬作用，基本无杀菌力； （2）主要作用是限制过敏反应的作用： ①抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞； ②吞噬其释放颗粒； ③分泌组胺酶破坏组胺； （3）参与蠕虫的免疫反应。 嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源 ①从嗜碱性粒细胞和肥大细胞来源的组胺； ②从补体来的C3aC5a； ③从致敏淋巴细胞来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； ④从寄生虫来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； ⑤某些细菌来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； ⑥从肿瘤来的嗜酸性粒细胞的趋化因子。 趋化因子↑→E↑ 嗜酸性粒细胞绝对数=WBC×E% 其中E%（嗜酸性粒细胞分类的比值）不准，进推算的绝对值误差较大； 故为达到准确计数嗜酸性粒细胞的目的，须做嗜酸性粒细胞直接计数。 [原理] 用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时使红细胞和大部分其他白细胞被破坏，并将嗜酸粒细胞着色，充入计数板，低倍镜下计数2个计数池共10个大方格内的嗜酸粒细胞数，经换算求得每升血液中的嗜酸粒细胞数。 [器材] ①采血针、干棉球、75%酒精棉球 ②试管、吸量管 ③计数板、显微镜 [试剂] 特点： ①为低渗溶液，可使红、白细胞溶解破裂； ②含对E的保护剂，如乙醇、乙二醇、丙酮； ③并使E颗粒染色而被识别。 下列试剂任选一种: 1.伊红-丙酮稀释液 2.溴甲酚紫稀释液? 3.Hinkelman稀释液 4.乙醇-伊红稀释液? 5.皂素-甘油稀释液 6.固绿稀释液? [操作] 0.38ml稀释液＋20μl血→混匀→RBC溶解后→混匀→充池（2个）→静置2-5min→镜下计数10个大方格E的数目。 [计算] E/L=10大方格E的数×20×106 =0.02N×109/L [参考值] 0.05-0.5×109/L [注意事项] 1.本实验必须在1h内完成，否则细胞被破坏，结果偏低； 2.及时混匀，不能过分振荡，以免细胞破坏； 3.统一采血时间，以免受生理变化； 4.注意与N区别，以免结果偏高； （N着色浅，颗粒小） 5.含乙醇、丙酮等保护剂会挥发，应注意其变化； 6.溴甲酚紫在酸性或中性时为橙黄色，在碱性显蓝，故器具要防酸。 [方法学评价] 1．显微镜计数法? 所需设备简单，简便易行； 求得的嗜酸粒细胞绝对值，比用白细胞总数和分类计数间接推算出的来的准确。 但重复性差，精确性不如血液分析仪法。 所采用的稀释液多种，其优缺点见表2-47 2．血液分析仪法? 五分类血液分析仪是目前最有效的嗜酸粒细胞计数的筛检方法， 分析速度快，准确性较高。 但仪器昂贵；当仪器提示嗜酸粒细胞增多伴直方图或散点图异常时，应采用显微镜直接计数法复检。 [临床意义] 生理变化 肾上腺皮质激素的作用: ①阻止骨髓释放E; ②使血中E到组织中去。 1）劳动、寒冷、饥饿、各精神刺激等→ 交感神经兴奋→ACTH↑→肾上腺皮质激素↑ →E↓。 2）年龄： 5岁以下 （0-0.8）×109/L 5-15岁 （0-0.5）×109/L 3）日间变化： 上午波动大，下午较恒定。 与糖皮质激素脉冲式分泌有关。 2.病理变化 1）增高：轻度 （0.5-1.5）×109/L 中度 （1.5-5）×109/L 重度 5×109/L 见于： ①寄生虫病：可达10%或更多。 ②变态反应性疾病：支气管哮喘、药物过敏反应、荨麻疹。 ③某些皮肤病：如湿疹、银屑病等。 ④血液病：如慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、脾切除术后等；嗜酸性粒细胞白血病；霍奇金病。 ⑤某些恶性肿瘤：如肺癌伴嗜酸性粒细胞增高。 ⑥某些传染病：感染期嗜酸性粒细胞常减低，猩红热急性期嗜酸性粒细胞增高。恢复期暂时性增高。 2）减少： ①长期使用肾上腺皮质激素； ②急性传染病早期：如伤寒、副伤寒； ③大手术、烧伤。 3）其他临床应用 (1)观察急性传染病的预后 (2)观察手术和烧伤患者的预后 (3)测定肾上腺皮质功能和垂体前叶功能： 促肾上腺皮质激素（ACTH）使肾上腺皮质产生肾上腺皮质激素，造成嗜酸性粒细胞减低。 直接