实验一果蝇性状观察与雌雄鉴别.doc

实验一：果蝇性状观察与雌雄鉴别 一、实验目的： 学习区别雌雄蝇和观察果蝇主要性状，掌握制备果蝇饲料和进行果一般方法。 二、实验原理： 果蝇为双翅目昆虫，用作实验材料的优点是:生长迅速,生活周期短,没12天左右即可完成一个世代;繁殖力较强,每只受精的雌蝇均可产卵400-500个;因此在短期内即可获得多数子代，有利于遗传学分析；培养条件简易可行；其突变形状多属形态变异，便宜观察，因此，果蝇在遗传学研究中得到广泛应用。 三、实验材料、用具和试剂： 饲养的野生型和几种常见的突变型果蝇。 双筒解剖镜，放大镜，饲养瓶或饲养管，麻醉瓶，白瓷板，棉塞，玻璃棒，镊子，大烧杯，酒精灯。三脚架，石棉网，标签，新毛笔，酒精棉球，吸水纸，玉米粉，琼脂，葡萄糖，酵母（原液或干粉），乙醚，丙酸或乳酸，死蝇盛留器，胶水 四、实验内容和步骤： 一）、制备饲料 1、准备作为饲养瓶的广口瓶或玻璃管（消毒、干燥）并按饲养器口部大小制备棉塞（消毒） 2、果蝇的幼虫和成虫的主要食物，都是饲料内繁殖的酵母菌。 按照下表成分和下述方法制备饲料。 常用的果蝇饲料及成分 玉米粉饲料 米粉饲料 水 100ML 100ML 琼脂 1．1G 1—1．5G 糖 10G 10G 玉米粉 11G 酵母菌夜（或粉） 数滴 数滴 杀霉剂（丙酸或乳酸） 12滴 1—2滴 米粉 10G 按配方之比例称量所需物品。先用定量中2/3的水将琼脂煮化，再加糖，溶化；再将玉米粉混合于1/3水内，搅匀后倾入琼脂糖夜中，一同煮沸，并随时用玻璃棒搅动，待煮沸数分钟，饲料成为可流动的浆糊状时，即倾入饲养器内。每一饲养器内的饲料厚度约为2CM即可。倾入饲料时，应注意勿使饲料倾在饲养瓶内的侧壁上，以免粘着果蝇。每一饲养器内装好饲料后，立即塞好棉塞，直立在一旁。 （两天后）待凝后，用镊子夹酒精棉球（拧干）将器内侧壁上的水珠和饲料擦干净，滴入1—2滴杀霉剂，并转动饲养瓶，使杀霉剂均匀分布于饲料表面，然后滴入或撒入酵母液或干粉，使其均匀分布于饲料表面。然后再在饲料内插上消毒的吸水纸（作用是吸取水分和供给幼虫化蛹的场所），塞好棉塞，放置于258℃左右的恒温箱内待用。 为了保证酵母菌和果蝇的良好生长和繁殖，必须注意防止霉菌和其他细菌在饲养瓶内繁殖，使用的杀霉剂只有一些抑制霉菌生长的作用，而无绝对防止的作用，因此关键在于各项操作中，严格消毒和灭菌。 二）、观察果蝇性状和雌雄鉴别 1、将准备观察的果蝇倾入用作麻醉瓶的干燥广口瓶内，麻醉瓶的口部大小与饲养瓶口部大小一致，以便倾入果蝇时，果蝇不致飞出。倾倒果蝇时，可将麻醉瓶的底部朝向光亮处，果蝇喜向光亮处飞集，能自然逐渐飞入麻醉瓶内。（或将麻醉瓶自立桌上，装有果蝇的饲养瓶口对口倒置于麻醉瓶上，用手亲拍饲养瓶，果蝇即进入麻醉瓶内。） 2、在原先制好的麻醉棉塞上滴上几滴乙醚，立即将麻醉棉塞塞好已装有果蝇的麻醉瓶，等待35分钟，果蝇都停止不动，即可取去麻醉棉塞，将果蝇倾出观察。如果用作杂交亲本或继续饲养的果蝇不能麻醉过度，以免致死（果蝇被麻醉后，若双翅外展呈45°角，即已致死）。如果麻醉不够，中途苏醒，可再麻醉。 3、将已麻醉的果蝇，倾于白瓷板上（或白纸上），置于双筒解剖镜或扩大镜下观察其主要性状,注意认清每一果蝇的复眼颜色，身体颜色，翅的长短及雌雄鉴别。 成蝇的雌雄性别的主要区别； 雌果蝇 体型较大 腹部末端稍尖 腹背面外观有5条黑色条纹 无性梳 外生殖器外观较简单 果蝇： 体型较小 腹部末端顿圆 3)腹背面外观有3条黑色条纹(两窄一宽) 有性梳 外生殖器外观较复杂 五、实验报告内容： 1、制备的饲料种类和饲养瓶（管）数个 2、观察到的果蝇体色，翅形，复眼颜色及雌雄成蝇的外形特征（记看要点并简单图示） （附：果蝇的生活史） 果蝇的生活史包括卵，爬幼虫，蛹和成虫四个阶段。 卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能产卵，卵长约0.5毫米，椭圆形，腹面稍扁平，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在食物或瓶壁上，不致深陷到食物中。 幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄，此时体长科达到4~~~5毫米，肉眼观察下可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器，稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一个唾腺管向前延伸，然后汇合成一条导管通向消化道，神经节位于消化道前端的上方。通过体壁，还可以看到一对生殖腺位于身体后半部的上方两侧，精巢较大，外观为一明显的黑色斑点，卵巢则较小，熟悉观察后可借以鉴别雌雄。幼虫的生活力强而贪食，在培养基上前进时便留下一道沟沟，沟多而宽时，表明幼虫生长良好。 蛹：幼虫生活7~8天后即化蛹，化蛹前从培养基上初附在瓶壁上，渐次形成蛹，起初颜色淡黄，柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，这就将要明显羽化了。