实验一（一）血清胆固醇的定量测定（磷硫铁法）-生命与环境科学学院.doc

兔子免疫血清和无免疫血清成分分析比较 作者：07生本 钟园园（同组：郑晓阳）学号 07112314131 指导老师：吴明江 （温州大学生命与环境科学学院，浙江温州，325027） 摘要　 血清主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1 、α2 、β、γ- 球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。通过盐析、透析、浓缩和凝胶层析可分离出清蛋白和γ- 球蛋白。本实验通过测定免疫血清和无免疫血清中总胆固醇和谷丙转氨酶的含量，探究动物免疫对血清成分含量的影响。结果表明，总胆固醇在免疫血清中比在无免疫血清中含量低，而谷丙转氨酶则较之高。 关键字 胆固醇；血清蛋白；谷丙转氨酶；成分分析 Author: zhongyuanyuan Tutor: wumingjiang （School of Life Environment Science, Wenzhou University, Wenzhou Zhejiang, 325027） Abstract ：The main components of the serum are water and all kinds of chemical elements,including albumin, α1, α2, β, γ-globulin, triglycerides, total cholesterol, alanine aminotransferase and so on. It can separate the albumin from γ-globulin by the salting-out, dialysis, enrichment and gel chromatography.The experiment measured the content of total cholesterol and alanine aminotransferase in immunity and no immunity serum to explore the influence the immunization does on the content of the compositions in immunity serum.The result shows,the content of total cholesterol in immunity serum is lower than that in no immunity serum,while the alanine aminotransferase is higher Keyword ：cholesterol; serum protein; alanine aminotransferase; component analysis 前言　血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1 、α2 、β、γ- 球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。动物在生命活动过程中常常会受到病原微生物的侵袭而发病甚至死亡。为了防止动物发生传染性疾病,所以常常对其进行免疫接种。动物获得免疫能力对自身生理有什么影响，这是一个值得研究的方向。本实验主要是粗略地测量血清中的成分在免疫后与无免疫中的含量变化，从宏观上把握免疫对血清成分含量的影响。 血清总胆固醇测定是血脂分析的常规项目,目前国内大多数实验室的常用方法有酶法、硫酸一磷酸一高铁显色法、硫酸一醋醉直接显色法、硫酸一醋酥煮沸显色法及邻苯二甲醛一硫酸显色法和邻苯二甲醛法等。本实验我们采用的是邻苯二甲醛法。其在临床上的意义：血清中总胆固醇的浓度可作为脂类代谢的指标，但脂类代谢又常与糖类及激素的代谢密切相关，故在其他物质代谢异常时亦可影响血清总胆固醇的浓度。 血清谷丙转氨酶活力的测定为一种较好的早期诊断肝炎的方法之一。其在临床上有重要意义：正常时，谷丙转氨酶主要存在于组织细胞内，以肝细胞含量最多，心肌细胞中含量其次，只有极少量释放入血中。所以血清中此酶活力很低。当肝脏、心肌病变、细胞坏死或通透性增加时，细胞内各种酶释放出来，使血清中此酶活性升高。所以测定血清中此酶的含量可作为诊断、鉴别诊断及预后观察的依据。 分离、纯化与鉴定γ—球蛋白的方法很多，本实验用醋酸纤维素膜电泳法对蛋白质进行量化、比较及特性鉴定，是较为经济、快速且可重复的方法。本次血清清蛋白与γ-球蛋白的分离与鉴定覆盖了传统生化技术，包括离心技术、层析技术、分光光度法和电泳技术。 　　 1 材料、仪器设备与方法 1. 1材料来源及处理 4号血清：由生命与环境科学学院生化试验室提供。从四只兔子分别提取血清用于生化实验，其