实验方法与指导.ppt

武汉大学药学实验教学中心 实验一、典型药物的鉴别试验 ----武汉大学药学院 2014年3月 * 实验目的 1 实验原理 2 实验方法与指导 3 注意事项 4 思考题 5 * 一、实验目的 1．了解药物鉴别试验的目的和特点。 2．掌握药物的常用化学鉴别方法及其影响因素。 3．掌握紫外光谱鉴别法和红外光谱鉴别法。 4．判断有标签容器中的苯巴比妥、对氨基水杨酸钠、 维生素B1片和注射用硫酸链霉素的真伪。 * 二、实验原理 （一）苯巴比妥的化学鉴别 化学鉴别方法的基本原理 银盐反应： 巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，遇过量硝酸银试液,即产生白色的二银盐沉淀。 * 2．铜盐反应：巴比妥类药物分子中含有-CONHCONHCO-丙二酰脲基团，可互变异构成烯醇型，与铜吡啶试液反应，产生类似双缩脲的颜色反应。 * 3．亚硝酸钠-硫酸反应： 含芳环取代基的巴比妥类药物，与亚硝酸钠-硫酸反应后，显橙黄色，其反应原理可能是苯环上的亚硝基化反应。 4．甲醛-硫酸反应： 含芳环取代基的巴比妥类药物，与甲醛-硫酸反应显玫瑰红色，其反应产物不明。 * （二）对氨基水杨酸钠的化学鉴别 2. 重氮化-偶合反应： 在酸性条件下可与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐再与碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮染料。 1. 与三氯化铁反应：对氨基水杨酸钠水溶液加稀盐酸酸化后，在中性或弱酸性（pH 4～6）条件下能与三氯化铁反应而显紫红色。 * * （三）维生素B1的化学鉴别 2. 本品的水溶液显氯化物的鉴别反应 1. 硫色素反应：维生素B1的专属反应 * （四）硫酸链霉素的化学鉴别 1．坂口反应： 链霉素水解产物链霉胍的特征反应。硫酸链霉素水溶液加氢氧化钠试液，水解生成链霉胍；链霉胍、8-羟基喹啉分别与次溴酸钠反应，其各自的产物再相互作用生成橙红色化合物。 * 2．麦芽酚反应： 链霉素的特征反应。链霉素在碱性溶液中，链霉糖经分子重排形成六元环后，生成麦芽酚，可与三价铁离子在微酸性溶液中形成紫红色配位化合物。 3. 本品的水溶液还显硫酸盐的鉴别反应 * 影响化学鉴别的因素 溶液的浓度 指被鉴别药物的浓度，一般过量 试剂的用量 一般过量 溶液的酸碱度 使各反应物有足够的浓度处于反应活化状态，使反应生成物处于稳定和易于观测的状态。 溶液的温度 反应时间 * 三、实验方法与指导 （一） 苯巴比妥的鉴别 （二） 对氨基水杨酸钠的鉴别 （三） 维生素B1片的鉴别 （四） 注射用硫酸链霉素的鉴别 * 三、实验方法与指导 1．取供试品约50 mg 加碳酸钠试液0.5 ml 与水 5 ml，振摇 2 min 滤过（如不浑浊可不必滤过） 滤液中逐滴加入硝酸银试液，即发生白色沉淀 振摇，沉淀即溶解 继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。 2．取供试品约50 mg 加吡啶溶液（1→10）5 ml，溶解后 加铜吡啶试液1 ml，即显紫色或生成紫色沉淀。 （一） 苯巴比妥的鉴别 样品量要足够50 mg。 * 三、实验方法与指导 3．取本品约10 mg 加浓硫酸2 滴与亚硝酸钠约 5 mg，混合，即显橙黄 色，随即转橙红色。(可用点滴板或干燥试管) 4．取本品约50 mg，置试管中 加甲醛试液1 ml 加热煮沸 冷却 沿管壁缓缓加浓硫酸 0.5 ml，使成两液层 置水浴中加热，接界面显玫瑰红色。 滴加浓硫酸时要非常缓慢，并且沿管壁逐滴加入（可直接用滴管加），方能成两液层；然后放入刚煮沸过的水浴中，静置加热，时间应足够（约1～2 min），则可得界面玫瑰红色。 操作过程中，避免振摇。 5．本品的红外吸收光谱应与对照图谱一致。（略） * * 三、实验方法与指导 1．取本品约10 mg 加水10 ml 溶解后 加稀盐酸 2 滴使成酸性 加三氯化铁试液1滴，应显紫红色。 2．本品50 mg 加1 mol/L氢氧化钠溶液0.6 ml 溶解后 用水稀释至100 ml，混匀 精密吸取该液1 ml 置于内含2.5 ml 磷酸盐缓冲液（pH 7.0）的50 ml量瓶中 用水稀释至刻