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离体蛙心灌流 西医机能中心 一、实验目的和原理： 1、目的： ①学习离体蛙心灌流的方法。 ②观察高钾、低钙对心肌收缩的影响和毒毛花苷K注射液的强心作用。 2、原理： 正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。 二、实验对象：蟾蜍 三、实验器械：蛙类手术器械、张力换能器、BL-420生物信号采集系统、任氏液、1%氯化钙溶液、1%氯化钾、毒毛花苷K注射液。 四、实验步骤 1、离体蛙心制备： （1）取一只蟾蜍，用探针破坏大脑和脊髓，背位固定在蛙板上。 3、连接仪器和装置 1.用试管夹将蛙心管固定 在铁支架上 2.把张力换能器固定铁支 架支台上，将与换能器相连的蛙心夹夹在心尖上。 4、观察项目 （1）描记正常心肌收缩曲线 （2）滴加1～2滴1%氯化钾溶液。冲洗 （3）以缺钙任氏液替换任氏液，观察心脏收缩幅度和频率的变化，然后加入1%CaCl23～6滴，观察心脏收缩幅度变化。冲洗 （4）加大前负荷，待心脏出现失代偿后，吸去部分任氏液加入毒毛花苷K注射液0.5ml，观察心脏收缩幅度变化。最后再加入0.5ml毒毛花苷K注射液，观察强心苷中毒。 五、注意事项 1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必须用任氏液冲洗3次。 2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。 3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 4.换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。 5.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。 * * K+参与心肌细胞的复极化和自律细胞的4期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K+浓度梯度，还与细胞膜对K+通透性有关，因此其影响是多方面的。 Ca2+对Na+内流存在竞争抑制作用，称膜屏障作用，对静息电位无影响。[Ca2+]o ↑可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。 （2）开胸、暴露心脏。 2.蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一松结；在左主A下再穿一线结扎。 1.2 在主动脉根部剪一斜口，将插管插入动脉圆锥， 在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定。 * * * * *