异补骨脂素.doc

附件17： 化妆品中补骨脂特征成分补骨脂素、异补骨脂素、 新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的检测方法 1 适用范围 本方法规定了用高效液相色谱法化妆品中补骨脂补骨脂素补骨脂素的。 本方法适用于化妆品中补骨脂补骨脂素补骨脂素的测定。方法提要 样品在经过提取后，经高效液相色谱仪分离，检测，作的补骨脂素补骨脂素对照品比较，保留时间定性，补骨脂素补骨脂素补骨脂素补骨脂素限样品0.5 g限ng） 检出浓度（μg/g） 补骨脂素补骨脂素3 试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯水为。 3.1 色谱纯。 3.2 ，纯度99%。3.3 异补骨脂素纯度99%。3.4 新补骨脂异黄酮，纯度98%。纯度99%。3.7 补骨脂特征性成分混合标准溶液=0.1 μg/mL）：称取（3.2）、补骨脂素（3.3）μg/mL的标准溶液。精密量取标准溶液mL置0 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度即得μg/mL的标准溶液3.8 补骨脂标准溶液：4 仪器 4.1 高效液相色谱仪：。 4.分析天平：感量为0.1g。 4.。 4.涡旋振荡器。 4.超声波清洗仪。 4.离心机：转速不小于000 r/min。5 测定步骤 5.1 样品处理 0.45 μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液备用。 液体类：称取0.5 g（精确至0.1 mg）样品，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混匀，必要时，转移至10 mL具塞塑料离心管中，以12000 r/min离心5 min，上清液经0.45 μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液备用。 固体粉类：称取0.5 g（精确至0.1 mg）样品，置10 mL量瓶中，加8 mL甲醇，混匀，超声提取20 min，放至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，必要时，转移至10 mL具塞塑料离心管中，以12000 r/min离心5 min，上清液经0.45 μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液备用。 5.2 高效液相色谱条件 色谱柱：C18柱（0 mm×4.6 mm，μm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂）； 流动相： 16 乙腈＋0.1%醋酸水溶液 40＋60 40＋60 70＋30 90＋10 90＋10 40＋60 注：梯度洗脱条件，操作者可根据样品的不同选择最佳条件，使与其他组分峰获得完全分离。 流速：1mL/min。 检测波长：2nm。 柱温：3℃。 进样量：10 μL。 测定 按色谱条件5.2），取标准溶液（3.）进样，进行高效液相色谱分析标准溶液进行高效液相色谱分析取溶液进样10 μL，5.5 阳性结果确证 确证 图1 4种补骨脂特征成分混合标准溶液（10 μg/ mL）HPLC色谱图 图2 补骨脂标准溶液（2 mg/mL）HPLC色谱图 色谱峰：1. 补骨脂素，2. 异补骨脂素，3. 新补骨脂异黄酮，4. 补骨脂二氢黄酮 1 2 3 4 1 2 3 4