提取与分离方法.ppt.ppt

第一章 总论-提取分离方法 1、提取、分离概念2、提取三种方法3、聚酰胺、硅胶柱层析分离的原理及应用 (三) 根据物质吸附能力差异进行分离 1. 物理吸附 1）基本规律：“相似者易于吸附” 2）基本特点：无选择性、可逆吸附、快速 3）三要素— 吸附剂 、溶质(被分离物)、溶剂 4）基本原理：吸附与解吸附的往复循环 吸附 再吸附 解吸 再解吸 直至分离 吸附剂 溶 质 溶 剂 强 弱 强 强 中 弱 弱 中 中 吸附剂如：硅胶 化合物极性大则Rf小 化合物极性小则Rf大 1. 物理吸附 5）柱色谱操作 (三) 根据物质吸附能力差异进行分离 装柱 上样 洗脱 接收 浓缩 检测 拌样 5）柱色谱注意事项 吸附剂用量：30-60倍于试样（100~200~300目） 色谱柱规格：h/d 15：1 ~ 20：1 (P36) 拌样：极性小溶剂——利于吸附 不溶者，可加稍大极性溶剂 洗脱剂：梯度逐渐↑，跳跃不能大 石油醚-乙醚＜石油醚-乙酸乙酯＜石油醚-丙酮 ＜氯仿-甲醇＜丙酮-水＜甲醇-水， 100:1, 50:1, 30:1, 20:1, 10:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1:1 极性大小 举例P35 洗脱顺序 举例P35 2. 化学吸附（较少用） 1）基本特点：有选择性、不可逆吸附 2）基本原理：产生化学反应 (1) 酸性物质与Al2O3发生化学反应 (2) 碱性物质与硅胶发生化学反应 (3) Al2O3容易发生结构的异构化 3）应尽量避免 3. 半化学吸附 √ 1）基本特点：介于物理吸附和化学吸附之间 2）基本原理：以氢键的形式产生吸附 (三) 根据物质吸附能力差异进行分离 聚酰胺，大孔吸附树脂 (三) 根据物质吸附能力差异进行分离 聚酰胺吸附层析原理 聚酰胺吸附层析原理 洗脱：溶剂分子与聚酰胺形成新的氢键，以替代原来化合物与聚酰胺的氢键 溶剂：水中递增醇 小极性（氯-甲） (三) 根据物质吸附能力差异进行分离 聚酰胺吸附层析 ————氢键与吸附力关系 成氢键基团数目多，吸附力强 易成分子内氢键者，吸附力弱 芳香化程度高，吸附力强 （1）形成氢键的基团数目越多，则吸附能力越强。 （2）成键位置对吸附力也有影响。易形成分子内氢键者，其在聚酰胺上的吸附即相应减弱。 吸附能力：（在水溶液中） （3）分子中芳香化程度高者，则吸附性增强；反之，则减弱。 吸附环境：水或低浓度醇中。 洗脱能力由弱至强： 水 →甲醇→ 丙酮→ 氢氧化钠水溶液 →甲酰胺 →二甲基甲酰胺 →尿素水溶液 应用：酚酸性、黄酮类成分分离 植物粗提物的脱鞣处理 练习 用聚酰胺柱层析： 在水中的吸附能力强弱：A＞B＞C 以不同浓度的乙醇-水进行梯度洗脱，流出柱外的顺序是 ： C ＞B＞ A ——主要与羟基数目有关 大孔吸附树脂 吸附原理：范德华引力及Ｈ键吸附，兼有分子筛原理 常用吸附剂：Amberlite、Diaion、GDX系列(有极性、中极性和非极性之分)，国产的常用D101 ， AB-8等 性质：理化性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂。 流动相：水或低浓度醇中 大孔吸附树脂的优点： 选择性好 吸附容量大，不受无机盐类及强离子、低分子化合物的干扰 解吸容易 机械强度高、耐污染、流体阻力小 反复多次使用，再生容易 大孔吸附树脂吸附环境： 影响吸附与分离因素： 大孔吸附树脂：比表面积、表面电性、形成H键与 否。 化合物性质：分子极性、分子大小、能否形成氢键 非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附； 极性化合物在水中易被极性树脂吸附。 上样溶剂性质：溶剂对样品成分的溶解性，溶剂PH值 上样溶液浓度：吸附量与上样浓度成反比 吸附流速：流速过大，吸附量下降；流速过小，吸附时间增加 洗脱剂的性质：洗脱剂的种类，丙酮＞无水醇＞含水醇＞H2O；洗脱剂的pH值 洗脱流速：一般0.5～5ml/min 应用：苷与糖的分离，苷类、生物碱的富集，黄酮类、三萜类化合物的分离等。 甜叶菊干叶 提取液 清液 热水提取三次 醇沉 D101树脂床 碱液洗 水洗 95%乙醇洗脱 洗脱液 脱色处理 甜叶菊苷结晶 例：田叶菊苷的提取分离 (三) 根据物质分子大小差异进行分离 1. 基本原理 利用分子筛的原理分离物质 分子筛层析 (molecular sieve filtration c