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上清液和沉淀物放射性分析 烟草花叶病毒(TMV) * 遗传物质必须具备的特点 1、具有存储巨大数量信息的可能 2、在生长和繁殖过程中能精确的自我复制 3、能指导蛋白质的合成从而控制生物的性 状和新陈代谢 4、分子结构相对稳定(但特殊情况下能产 生变异) 问题:两种不同的推测如何求证呢? DNA是遗传物质的证据 格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验 艾弗里确定转化因子的体外转化实验 噬菌体侵染细菌的实验 一、格里菲思转化实验(体内转化) 有多糖荚膜 光滑 S型细菌菌落 无多糖荚膜 粗糙 R型细菌菌落 毒性 荚膜 菌落 两种菌落的比较 无毒 有毒 败血症 是病菌侵入血液循环而发生的全身性感染。细菌可在血中大量繁殖而引起全身中毒症状,致病菌可随血流到各器官组织造成迁徙性病灶。 ?(1)临床表现:寒战、高热、头痛、呕吐、呼吸加快、心率增速等;严重者出现神志改变或感染性休克;肝脾肿大,以瘀点为主的皮疹,大关节疼痛或红肿。病程长者常发生迁徙性病灶或脓肿,少数可有黄疸。(2)实验室检查:血白细胞计中粒细胞比例增多,血培养有致病菌生长。 小资料 [过程探究1]格里菲思的实验: [知识建构1 (实验结论)]加热杀死的S型细菌中,必然含有某种促成这一转化的活性物质——“转化因子”。 ? 哪种物质是转化因子? [过程探究1]格里菲思的实验: [实验设计]寻找转化因子: 但究竟哪一个才是转化因子呢? 在杀死的S型细菌中含有哪些物质? 艾弗里的实验设计有什么巧妙之处? ①把DNA和蛋白质分开,单独地、直接地观察DNA的作用; ②设计对照实验,用DNA酶处理,观察DNA的作用。 二、艾弗里的体外转化实验: 【高考警示钟】 肺炎双球菌转化的实质和影响因素 (1)在加热杀死的S型细菌中,其蛋白质变性失活,但不要认为DNA也变性失活,DNA在加热过程中,双螺旋解开,氢键被打开,但缓慢冷却时,其结构可恢复。 (2)转化的实质并不是基因发生突变,而是S型细菌的DNA片段整合到了R型细菌的DNA中,即实现了基因重组。 (3)在转化过程中并不是所有的R型细菌均转化成S型细菌,而是只有少部分R型细菌转化为S型细菌。原因是转化受DNA的纯度、两种细菌的亲缘关系、受体菌的状态等因素影响。 D B 例.肺炎双球菌转化实验中,将加热杀死的S型细菌与R型活细菌相混合后,注射到小鼠体内,在小鼠体内S型和R型细菌含量变化情况如右图所示。下列有关叙述错误的 A.在死亡的小鼠体内存在着S型、R型两种类型的细菌 B.曲线ab段下降的原因是R型细菌被小鼠的免疫系统所消灭 C.曲线bc段上升,与S型细菌在小鼠体内增殖导致小鼠免疫力降低有关 D.S型细菌数量从0开始是由于R型细菌基因突变的结果 D 噬菌体的模式图 资料一: 在T2噬菌体的化学组分中,60%是蛋白质,40%是DNA。对蛋白质和DNA的进一步分析表明:S仅存在于蛋白质分子中,99%的P都存在于DNA分子中。 放射性同位素标记法 思考:能用放射性同位素标记C、H、O、N吗?为什么? 三、 噬菌体侵染细菌的实验 培养大肠杆菌 培养T2噬菌体 噬菌体---蛋白质( 35S) 32P 35S 培养大肠杆菌 培养T2噬菌体 大肠杆菌(32P) 噬菌体---DNA( 32P) 标记噬菌体的方法 大肠杆菌(35S) 组装 合成 注入 吸附 释放 侵染别的细菌 噬菌体侵染细菌的动态过程 离心 离心 【T2噬菌体侵染细菌实验过程】 ① 用 放射性同位素35S 标记噬菌体 蛋白质外壳 子代噬菌体 35S 噬菌体侵染细菌时,蛋白质外壳留在外面, 没有进入到细菌中。 实验表明 无35S 亲代噬菌体 想一想:这一结果说明了什么? 【实验三、T2噬菌体侵染细菌实验】 ② 用 放射性同位素32P 标记噬菌体内部 DNA 32P 子代噬菌体 实验表明 噬菌体侵染细菌时,DNA 进入到细菌中。 亲代噬菌体 有 32P 想一想:这一结果又说明了什么? 【实验三、T2噬菌体侵染细菌实验】 亲代噬菌体 寄主细菌内 (大肠杆菌) 子代噬菌体 实验结论 DNA 是遗传物质 实验结果 35S 32P 没有被标记 35S 标记蛋白质 32 P 标记DNA 无35S标记蛋白质 无32P标记DNA 外壳蛋白质无35S DNA有32P标记 【实验三、T2噬菌体侵染细菌实验】 注意:不能证明Pr不是遗传物质。 35S 为什么沉淀物含少量放射性? 搅拌不充分,少量含35S的噬菌体吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。 为什么上清液含少量放射性? 1.保温时间过短,有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌,经离心后分布于上清液中。 2.保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代,经离
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