癌基因与抑癌基因癌基因与抑基因癌基因.ppt

* * * * * * * * * * Nm (non-metastasis):抑制转移的作用；dcc(deleted in colorectal carcinoma) :黏附分子；mcc: 活化的G蛋白； * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * ATM: ataxia telangiectasia mutated(突变后患运动失条性毛细管扩张症基因表达蛋白)，丝/苏氨酸蛋白激酶； GADD45: grouth arrest and DNA damage inducible ，生长停止和DNA损伤诱导的基因表达蛋白，可激活PCNA(proliferating cell nuclear antigen)和抑制CDK3,从而抑制DNA合成和促进DNA修复 * * * * * * 三、肿瘤发生是多因素、多基因和多阶段相互协调作用的癌变过程 多种遗传缺陷：点突变、易位、基因重排、移码突变、缺失突变和插入突变等 癌基因产物之间协同：核内癌基因产物与胞浆癌基因产物发生协调作用，如Myc与Ras。 癌基因与抑癌基因以及其它相关基因之间的协调 正常上皮 过渡增生上皮 早期腺瘤 中期腺瘤 晚期腺瘤 腺瘤 转移癌 FAP、MCC 基因突变或缺失 DNA低甲基化 k-ras 基因突变 dcc 基因突变 p53 基因突变 nm 基因突变等 结肠直肠癌发生发展过程中多种基因改变 是这些变化的积累，而不是它们之间发生的顺序。 原癌基因与抑癌基因的检测及评价 基因检测 核酸扩增: PCR, RT-PCR 凝胶电泳: DGGF (变性梯度凝胶电泳） 核酸杂交: Southern blot , Northern blot, FISH 基因芯片技术 基因产物的检测 蛋白质: 原位检测，ELISA, RIA 检测方法：1、PCR／ASO探针法(PCR-allele-specific  oligonucleotide 该方法快速、灵敏度高，但点突变的检出仅限于突变探针的探测位点，不能检出探针邻近部位的点突变。 2、限制性片段长度多态性(RFLP)分析 3、PCR-SSCP、测序等 突变更易于检出，扩增的DNA片段在非变性凝胶电泳中，因电泳迁移率不同，所有突变的ras基因均可与相应的正常基因区分开来。并且，若同一位点发生不同核苷酸替代形成的点突变，或同一核苷酸在不同位点替代形成的点突变，均可显示不同的电泳迁移率。 4、Southern Blot DNA digestion with restriction endonuclease Transfer of the DNA to a membrane Hybridization with a specific probe autography Electrophoresis of the DNA Single-color FISH double-color FISH Detection of the BCR, ABL and BCR-ABL genes by single- and dual-color fluorescence in situ hybridization (FISH). represents signals for ABL, for BCR. Chromosome are shown on the left and interphase nuclei on the right 9 22 Normal Ph1-positive Normal Ph1-positive 基因芯片 Stanford 乳腺癌微矩阵(Perou et al.1999) * * * * * * * * * * * 已知B淋巴细胞中免疫球蛋白重链基因表达十分活跃，其启动子为强启动子，且在CH-VH之间还有增强子区，c-myc易位后与IG重链基因的调控区为邻，因而被激活。正常情况下，位于c-myc5’端的两个启动子受到c-myc产物的反馈抑制，由此重排时5’端序列有丢失，结果摆脱了抑制而表达增强。 * * * * * * * * 不同程度磷酸化后，都可使p105活性缺乏或完全消失。非磷酸化的Rb可防止细胞增殖，当DNA肿瘤病毒抗原结合了非磷酸化的Rb时，Rb的活性就受到抑制，使细胞转化为无限增殖状态，形成肿瘤。 pRb蛋白作用示意图 myc,myb,cdc2 DNA聚合酶 胸苷激酶 , 二氢叶酸还原酶, pRb CYCA CDK2 RB pathway and function RB-E2F 1、p53基因的发现 曾错误把P53基因定为癌基因