生物化学-核酸化学349幻灯片.pptVIP

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核酸化学 核酸与蛋白质是最重要的生物大分子。核酸有两类:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)和核糖核酸(ribonucleic acid, RNA)。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域,是基因工程操作的核心分子。 一、核酸的研究发现史 1868年,F. Miescher从细胞核中分离得到一种富含磷的酸性物质,即现在被称为脱氧核糖核蛋白的物质。 1889年,Altman等从酵母和动物的细胞核中制备了不含蛋白质的核酸,首次使用“核酸”一词命名。 1944年,Avery的肺炎双球菌转化实验: 98%细胞核内(染色体中) 真核细胞 线粒体 核外 叶绿体 DNA 拟核 原核细胞 核外:质粒(plasmid) 病毒: DNA病毒 RNA主要存在于细胞质中,少量存在于细胞核中; 三、核酸的生物学功能 第二节 核酸的结构 一、戊糖 四、核苷酸(nucleotide) 核苷酸:核苷中的戊糖羟基被磷酸酯化 核苷+磷酸 戊糖+碱基+磷酸 五、核苷酸衍生物 1. 继续磷酸化 2.环化磷酸化 3. 肌苷酸及鸟苷酸(强力味精) 六、多聚核苷酸(核酸) 多聚核苷酸是通过一个核苷酸的C3’-OH 与另一分子核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。 第三节 DNA的结构 一、DNA的一级结构 脱氧核苷酸的排列顺序; 可用碱基排列顺序表示 连接键: 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 碱基形成侧链 多核苷酸链的方向性; DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 二、DNA的三级结构 三、rRNA 尾结构: ● 转录后由poly(A)聚合酶催化加尾 ● PolyA是mRNA由核进入胞质所必需的形式。 ● polyA与mRNA半寿期有关, PolyA大大提高mRNA在胞质中的稳定性。 三、核酸的变性、复性与分子杂交 1. 变性 稳定核酸双螺旋次级键断裂,空间结构破坏,变成单链结构的过程。核酸的的一级结构(碱基顺序)保持不变。 变性表征 生物活性部分丧失、粘度下降、浮力密度升高、紫外吸收增加(增色效应) 变性因素 pH(11.3或5.0) 变性剂(脲、甲酰胺、甲醛) 低离子强度 加热 本 章 小 结 核酸是遗传物质载体的证明和研究历史 核酸的化学结构:戊糖、碱基(A、T、G、C、U),核苷、核苷酸及其衍生物的结构特点(原子编号) DNA的结构:一级结构(核酸序列及其表示)、二级结构( Watson -Crick双螺旋模型、Z-DNA)、结构维持的化学键 RNA结构与功能:碱基组成特点、RNA的种类结构及功能 核酸的性质:酸碱性、变性与复性、分子杂交 复习题 1、DNA分子具有哪些结构特征? 2、稳定DNA双螺旋结构的因素有哪些? 3、核酸具有哪些性质? 二、tRNA 三叶草形二级结构模型; 碱基配对构成双螺旋区叫臂,不配对部分叫环,tRNA一般具四臂四环结构; 氨基酸臂 二氢尿嘧啶环 反密码环 额外环 TψC环(假尿嘧啶环) 碱基组成中含有较多的稀有核苷酸; 倒L形的三级结构 tRNA的三级结构 tRNA的功能: ●转运氨基酸 ●识别密码子 ●参与翻译起始 ●参与DNA的反转录 ●参与基因表达调控 占RNA总量的80%,是构成核糖体的骨架; 18s 5s、5.8s、28s 40s 80s 50s 16s 5s 、23s 30s 70s 50s rRNA 核糖体 rRNA 核糖体 真核生物 原核生物 rRNA的功能: ● 组成核糖体 ● 催化肽键合成 ● 参与tRNA与mRNA的结合 大肠杆菌5SrRNA的结构 四、mRNA 是蛋白质合成的模板,占细胞总RNA的3%~5%; 真核细胞mRNA的结构有明显特征,3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA),称为 “尾结构” ,5’ -末端有一个甲基化的鸟苷酸,称为“帽结构” 。 甲基鸟苷5’,5’-三磷酸 ●由甲基化酶催

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