实验九、薄层色谱.ppt

实验十一、薄层色谱 薄层色谱原理跟其它色谱法一样，都是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附分配性质不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将组分分开。 薄层色谱常用TLC表示，是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。它适用于几到几十微克小量样品的分离，也用于精制多达500mg样品。此法特别适用于挥发性较小或在较高温度下易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。 一、实验目的 了解掌握薄层色谱的原理及方法。 二、 试剂 3g硅胶，7ml0.5%CMC。 点样试剂：①A：自制乙酰二茂铁混合物甲苯溶液，②B：二茂铁甲苯溶液，③C：1取代乙酰二茂铁甲苯溶液，④D：2取代乙酰二茂铁甲苯溶液。 展开剂：30：1=甲苯：乙醇 三、 装置图 五、操作规程 六、操作要点 1、薄板涂层时要均匀、不要太厚。否则斑点分离效果不好。 2、薄板涂好后静置和活化时间要够，否则板易裂，且斑点无法分开。 3、划起始线时，要轻，不要刺破薄层。 4、点样毛细管粗细要合适，直径约0.5mm。斑点直径一半不超过2mm，样点过大，易造成拖尾、扩散等现象，以致不容易分开。 * * 薄层色谱常用的有吸附色谱与分配色谱两类，吸附色谱常用的吸附剂是氧化铝和硅胶，分为不同类型。象不加粘合剂叫硅胶H，加了粘合剂的硅胶叫硅胶G等。通常将加粘合剂制成的薄层板叫硬板，将不加粘合剂的薄层板叫软板。本实验制备的薄板即是加了粘合剂的硬板。 薄层色谱是在洗净的玻板上均匀涂一层吸附剂或支持剂，待干燥活化后，将样品溶液用管口平整的毛细管，滴加于离薄层板一端约1cm处的起始线上，晾干或吹干后，将薄层板置于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度约0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，立即在展开剂前沿处作一记号。干燥后喷以显色剂*，最后记录原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值Rf 。 *本实验由于使用样品本身有颜色，故不需要显色剂。 下面结合本实验要分离的物质，具体讲一下实验室薄层色谱操作步骤。 1cm h 1cm h2 h1 1-1.5 1cm 45-60o 薄层层析示意图 薄板II同上法在薄板起始线中间点C一个样点 分别量出每块薄板上各个分离样点以及溶剂前沿距起始线的距离，计算每个点的Rf 。