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第4章微生物生长第4章微生生长第4章微生物生长第4章微生物生长
第 4 章 微生物的生长 1.微生物的生长 一个微生物细胞在合适的外界环境条件下,不断地吸收营养物质,并按其自身的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用,则其原生质的总量(重量、体积、大小)就不断增加,于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长,即各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到一定程度后就会发生繁殖,从而引起个体数目的增加,这时,原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长,就引起了这一群体的生长,这可从其重量、体积、密度或浓度作指标来衡量。 微生物的生长表现在微生物的个体生长与群体生长两个水平上。 2.微生物个体生长 表现为个体质量和体积的增加。 3.微生物群体生长 以微生物细胞的数量或微生物群体细胞物质量的增加作为生长的指标。 个体生长→个体繁殖→群体生长 群体生长=个体生长+个体繁殖 因而要了解微生物的生长规律,就要了解微生物的个体生长和群体生长两个方面。 4.2 微生物生长量的测定 微生物特别是单细胞微生物,体积很小,个体生长很难测定,意义也不大。通常测定微生物的生长是测群体的生长,而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。 涂片染色法 比浊计数法 浊——细菌悬浮液的浊度 (二) 测定活菌数 1、液体稀释培养基计数: 将待测样品作连续10倍稀释,一直稀释到稀释液的少量接种到新鲜培养基中没有或极少生长。记录每个稀释度出现生长的试管数,再用最大或然率理论,查MPN(most probable number,最大可能数量)表,根据样品的稀释倍数就可计算出其中的活菌含量。 一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。 稀释液体计数法 特点:液体培养、统计学查表计数 又称MPN法 (或最可能数法) Most Probable Number 例如测定SRB(硫酸盐还原菌,厌氧)的数量 提问:能用稀释平板法计数吗?为什么? 一般不能,厌氧菌暴露在空气中不能生长(除非厌氧培养箱) 比例计数法 比例——样品菌液与等体积的血液混合,观测二者比例 统计-查表-计算 根据不同稀释度变黑试管 ①统计出数量指标 三位数及其中最低稀释度 (取变黑的管数最多、稀释度又最低的生长管数,为第一位数字,后面两个稀释度的生长管数后两位数) ②查表 表——MPN表 世代:由1个细胞分裂成为2个细胞的间隔被称为世代。 代时:就是一个世代所需的时间,因而也就是群体细胞数目扩大1倍所需的时间,有时也被称为倍增时间。 2.氧气对微生物生长的影响 微生物对氧的需要和耐受力在不同的类群中变化很大,根据微生物与氧的关系,可把它们分为几种类群: 好氧菌:专性好氧菌;微好氧菌 兼性厌氧菌:耐氧厌氧菌: 厌氧菌:(专性)厌氧菌 几个基本概念 作业 作业 1、微生物的生长曲线可分几期?其划分的依据是什么? 2、什么是微生物的最适生长温度?温度对同一微生物的生长速度、生长量、代谢速度、代谢产物积累量的影响是否相同?研究它有何实践意义? 3、试比较杀菌、商业灭菌、消毒、防腐的异同点。 4.5.1控制微生物的化学物质 抗微生物剂 抗代谢物 抗生素 酸和碱:医院病房常用乙酸消毒。 重金属极其盐类:升汞 有机化合物 :醇、醛、酚是常用的杀菌剂。 氧化剂:高锰酸钾、双氧水等 卤素:氯,碘是常用的消毒剂 染色剂 表面活性剂 nwsuaf-micro 抗微生物剂(antimicrobial agent) ——杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质 抗代谢物(antimetabolite) 有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相 似,以至可以和特定的酶结合,从而阻碍了酶的功 能。干扰代谢的正常代谢。这些物质称为抗代谢物。 叶酸 磺胺类药物 nwsuaf-micro 嘌呤 6-巯基嘌呤 氨基酸 5-甲基色氨酸 吡哆醇 异烟肼 每种抗生素都有一定的杀菌范围,称为抗菌谱。 nwsuaf-micro 抗生素(antibiotic) 是由微生物在代谢过程中产生(有的可人工合成)具有一定浓度下抑制或杀死其他微生物的有机化合物。 抑制细胞壁的形成 干扰蛋白质合成 抑制核酸复制 影响细胞膜的功能 高温灭菌 辐射作用 过滤作用 高渗作用 超声波 4.5.2 控制微生物的物理因素 1.高温灭菌(消毒)法——是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。 煮沸消毒法 将水加热至100℃,煮沸15min—30mi
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