细菌自动鉴定及药敏系统的研进展细菌自动鉴定及药敏系统的研究进展细菌自动鉴定及药敏系统的研究进展细菌自动鉴定及药敏系统的研究进展.doc

细菌自动鉴定及药敏系统的研究进展 发布时间06年01月17日 15时36分 　 　　陶庆春 安鹏 陈小丹 　　细菌的鉴定是细菌分类的实验过程。长期以来，临床微生物实验室一直沿用100多年前由Gram、Pasteur、Koch、Petri等创造的传统的微生物学鉴定方法，这些传统的鉴定方法不仅过程烦琐，费时费力，且在方法学和结果的判定、解释等方面易发生主观片面而引起的错误，难以进行质量控制。　　20世纪60年代以后，微生物学家和工程技术人员密切合作，对微生物的研究采用了物理的、化学的分析方法，发明了许多自动化仪器，并根据细菌不同的生物学性状和代谢产物的差异，逐步发展了微量快速培养基和微量生化反应系统，使原来缓慢、烦琐的手工操作变得快速、简单，并实现了自动化和机械化。微生物鉴定自动化方法，包括（1）临床微生物鉴定系统；（2）气液色谱分析；多用于研究；（4）化学发光技术；可鉴定一些细菌少数分枝杆菌属和一些真菌。80到90年代发展迅速，并广泛用于临床。1985年第一台自动化细菌分析化仪器Vitek-AMS进入中国并成功使用。1999年底法国梅里埃公司推出VITEK2系统，从接种物稀释、密度计比较及卡冲填和封卡等步骤均实现了全自动化。目前已有多种微生物自动鉴定及药敏测试系统问世，如VITEK-Au-toMicrobicSystem（AMS）、PHOENIXTM、MicroScan、Sensi-titre、ABBott（MA-2 System）、AUTOBACIDXSys-tern等。这些自动化系统具有先进和微机系统，广泛的鉴定功能，适用于临床微生物实验室。卫生防疫和商标标系统，主要功能包括细菌鉴定、细菌药物敏感性试验及最低抑菌浓度（MIC）的测定等。其准确性和可靠性均已大大提高。 需要生长 分析 阳性结果显示 系统例子 PH基础反应（多为15-24小时） 是 碳源利用 PH指示剂颜色变化；利用碳源源产生酸，利用氮源产碱 API CrystaIV ITEK MicroScan 酶谱（多为2-4小时） 否 微生物已有的酶 当无色复合物被适当酶水解时，色源/荧光源释放引起颜色变化 Microscan IDS （Remel） 碳源利用 是 有机产物 因转移电子至无色四唑氮标记碳源使染料变为紫色 Biolog 挥发的或非挥发的酸检测 是 细胞脂肪酸 以检测代谢产物以基础的层析技术，与数据库中的数据相比较 MIDL 生长可见检测 是 不同底物 微生物利用某一底物产生浊度 酵母样菌 　　2用上述原理的各种鉴定系统可鉴定肠杆菌科，非发酵菌，革兰阳性球菌，革兰阴性球菌，厌氧菌和酵母菌。目前较完善的鉴定系统性能比较。　　　　　　　　　　　　　自动鉴定系统性能比较 Vitek AutoSCAN-4 Walk/Away Senititre 无限 60 polor 系统内容 32/60/120 无限 40/96 92 无限 数据库中可鉴定菌种数 566 480 需氧革兰阴性杆菌（NG） 116 112 139 147 246 240 78 需氧革兰阳性球菌 50 49 49 否 否 815 否 厌氧菌 否 58 54 否 否 50 否 苛氧菌 否 21 20 否 194 否 酵母菌 36 40 42 否GN中孵育 否 28 否 分枝杆菌 否 否 否 否 手工 自动 否 接种 自动 手工 手工 自动 分开 联机 自动 孵育 联机 分开 联机 联机 4或16h 30min 分开 需氧革兰阴性杆菌 2-18h 24或48h 2或15-42h 5或18h 4或16h 30min 18-24h 需氧革兰阳性球菌 2-15h 24或48h 2或15-42h 30min 厌氧菌 否 4h 4h 30min 酵母菌 24或48h 4h 30min 分枝杆菌 否 否 否 否 手工加试剂 否 是 否 室温 4 室温 是 贮存温度（℃） 4 室温，4 室温，4 室温 其它性能 是 否 否 药敏试验 是 是 是 否 否 否 是 尿筛检/鉴定 是 否 否 是 是 是 是 DMS 是 是 是 是 计算机接口 是 是 是 Biology MIS Autosce 　　三、常见细菌自动鉴定及药敏系统工作原理　　（一）半自动微生物鉴定和药敏系统　　1．VITEK-ATB　　ATB鉴定系统是将肉眼观察的结果输入计算机，计算机数据库由许多细菌条目（taxa）组成，将输入结果与数据库内细菌条目比较，自动地得到鉴定结果，ATB敏感性试验采用半固体琼脂培养基，不同的药敏试条含有不