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第四章 微生物的营养 第一节 微生物的营养物质 根据营养物质的性质和作用可分为:碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。 一、碳源: 二、氮源: 三、能源: 四、生长因子: (一)生长因子自养型微生物: (二)生长因子异养型微生物: (三)生长因子过量合成微生物: 五、无机盐: 六、水: 第二节 微生物的营养类型 根据微生物需要的碳源和能源这两大要素进行分类,可分为:光能无机营养型、光能有机营养型、化能无机营养型和化能有机营养型。 一 、光能无机营养型:如兰细菌、绿硫细菌等。 H2O+CO2----(CH2O)+O2 2H2S+CO2----(CH2O)+H2O+2S 二、光能有机营养型:(光能异养型)如红螺菌 三、化能无机营养型:(化能自养型) 大部分生物都属于这种类型。 四、化能有机营养型:(化能异养型) 化能异养微生物又可根据它们获得养料的方式而分为腐生和寄生两大类。 第三节 微生物对营养物质的吸收方式 一、单纯扩散:(Simple Diffusion) 二、促进扩散:(Facilitated Diffusion) 三、主动运输:(Atcive Transport) 四、基团移位:(Group Translocation) 第四节 培养基 概述:培养基是人工配制的,适合微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质。 作用: 一、选用和设计培养基的原则和方法 (一)四条原则: 1、明确目的: 2、营养协调: 3、物理化学条件适宜: (1)PH:(2)渗透压和aw (3)氧化还原电势Eh 4、经济节约: (二)四种方法: 1、生态模拟: 2、查阅文献:参阅文献中的现有资料、数据等。 3、精心设计:借助优选法或正交试验工具。 4、试验比较:小试---中试---生产。 二、培养基的种类: (一)按对培养基成分的了解程度分: 1、天然培养基:用途,优点,缺点 2、组合培养基:(合成培养基或综合培养基)优点,缺点,用途 3、半组合培养基:优点,缺点及用途 (二)按物理状态分: 1、固体培养基:概念 (1)凝固培养基: (2)非可逆性凝固培养基: (3)天然培养基: (4)滤膜: 2、半固体培养基:概念、用途 3、液体培养基: 4、脱水培养基:(dehydrated culture media) (三)按培养基的功能分: 1、基础培养基: 2、选择性培养基: 3、加富培养基: 4、鉴别培养基: 第五节??????? 微生物的纯培养 我们把只有一种微生物的培养物称为纯培养物。这一过程称为微生物的纯培养。 一、 固体培养基分离纯培养: 二、液体培养基分离纯培养: 三、单孢子分离法: 四、选择培养基分离: 一、?????? 固体培养基分离纯培养: 1、 稀释平板法:(pour plate method) 无菌水稀释样品——取不同稀释度的样液与50。C的固体培养基混合——倒置培养——挑取菌落——重复——纯种 2、 平板划线法(spread plate method): 以无菌接种环沾取少量样品,在平板上划线。 3、稀释摇管法(dilution shake culture): 熔化固体培养基并冷却到50。C左右——将待分离的材料用此培养基梯度稀释(同稀释平板法似)——迅速摇匀——凝固后在试管中倒一层固体石蜡和液体石蜡的混合无菌液——培养——在琼脂柱中形成菌落——用无菌无氧的空气将琼脂柱吸出——用无菌刀将琼脂柱切成段——观察或移植。 二、液体培养基分离纯培养: 接种物在液体培养基中进行顺序稀释,使一支试管中分配不到一个微生物,如果经稀释后的大多数试管中没有微生物生长,那么有微生物生长的试管得到的培养物可能是纯培养物。 三、单孢子分离法: 此法是用显微分离法从混杂的群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。主要用具是显微镜、解剖镜或显微操作仪等。一般在专业化较高的实验进行。 四、选择培养基分离: 这种方法非常适合于含量低的微生物 1、? 利用选择培养基直接分离: 主要是根据待分离微生物的特点选择不同的培养条件。如在土壤中筛选蛋白酶产生菌,可有培养基中加牛奶或酪素,微生物生长时若产生蛋白酶,则会水解牛奶或酪素产生蛋白质水解圈,这样可将大量非产蛋白酶的微生物淘汰。也可用高温、抗生素等分离一些特定的微生物。 2、? 富集培养: 原理:是利用不同微生物间生命活动特点的不同,制定特定环境条件,使仅适应于该条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,更容易分离出特定的微生物。 * *
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