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第十五章 色谱法导论 Chromatography 2、基本术语： 固定相：填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）。 流动相：自上而下运动的一相（一般是气体、液体或超临界流体）。 色谱柱：装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）。 二、色谱法的分类： 1、按两相物理状态分类 2、按固定相的形式分类 3、按分离过程的化学原理分类 吸附色谱法：利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法。 分配色谱法：利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而达到分离的方法。 离子交换色谱法：利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同而达到分离的方法。 凝胶色谱法 亲和色谱法 §15.2 色谱基本概念 一、色谱分离过程 混合物样品（A+B）→色谱柱中分离→检测器→记录下来。组分从色谱柱流出时，各个组分在检测器上所产生的信号随时间变化，所形成的曲线叫色谱图。 记录了各个组分流出色谱柱的情况，又叫色谱流出曲线 二、色谱常用术语 2、基线—在实验操作条件下，色谱柱中只有流动相通过（没有组分流出时）的曲线叫基线。 稳定情况下：一条水平直线。 基线上下波动称为噪音。 3、色谱峰的高度h 峰高h —色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm，mV，mA表示。峰的高低与组分浓度有关，峰越高越窄越好。 4. 色谱峰的宽度 标准偏差σ——峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。 峰底宽Wb——色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离 Wb =4 σ 半峰宽W1/2——峰高一半处色谱峰的宽度 W1/2 =2 .354 σ W1/2 =0.589Wb 5. 色谱峰面积A ——色谱峰与峰底所围的面积。 对于对称的色谱峰 A=1.065h W1/2 对于非对称的色谱峰 A=1.065h(W 0.15+W 0.85)/2 （1）死时间t0——不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。 从进样开始到柱后出现峰最大值所需的时间。 气相色谱—惰性气体（空气、甲烷等）流出色谱柱所需的时间。 (2)保留时间tR ———组分流经色谱柱时所需时间。进样开始到柱后出现最大值时所需的时间。操作条件不变时，一种组分对应有一个tR定值。 （3）调整保留时间t’R 扣除了死时间的保留时间。 t’R=tR-t0 t’R体现的是组分在柱中被吸附或溶解的实际时间。 保留值用体积表示： （4）死体积V0—不被固定相滞留的组分流经色谱柱所消耗的流动相体积称死体积，色谱柱中载气所占的体积。 V0=t 0F0 F0为柱后出口处流动相的体积流速mL/min （5）保留体积VR —组分从进样开始到色谱柱后出现最大值时所需流动相体积，组分通过色谱柱时所需流动相体积。 VR =t RF 0 （6）调整保留体积V’R—扣除了死体积的保留体积，真实的将待测组分从固定相中携带出柱子所需的流动相体积。 V’R= t’RF 0 V0、t0与被测组分无关，因而V’R 、t’R更合理地反映了物质在柱中的保留情况。 （7）相对保留值γ2，1或γi ,s —在相同操作条件下，组分2或组分i对另一参比组分1或s调整保留值之比 （8）保留指数：是一种重现性较好的定性参数 规定正构烷烃保留指数为分子中碳原子个数乘以100，如正己烷、正庚烷的保留指数分别为600和700。 被测物质的保留指数Ix可采用两个相邻正构烷烃的保留指数进行测定 将碳数为n和n+1的正构烷烃加到被测物质x中进行色谱分析，测得它们的保留值 保留指数计算方法 由色谱流出曲线，可以看出： (i)根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含 组分的最少个数； (ii)根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析； (iii)根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析； (iv)色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据； (v)色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。 7、分配系数K 在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相间达到分配平衡时的浓度比值，用K表示。 8、分配比k 在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达到平衡时的质量比，称为分配比，也称容量因子，用k表示。 分配系数和分配比之间的关系 分配系数K：与柱中固定相和流动相的体积无关，而取决于组分及两相的性质，并随柱温、柱压变化而变