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一种从动物源性化妆品中快速提取DNA的方法研究 　　摘要：为了达到从分子水平上检测化妆品动物源性成分的目的，本研究建立了一种从化妆品中提取动物源性基因组DNA的方法。该方法使用Chelex-100结合玻璃奶提取化妆品中的基因组DNA，具有污染小、操作简单、快速、高效等优点。分别利用紫外分光光度计、普通PCR和DNA测序等方法对提取DNA的质量进行检测，结果表明DNA浓度和纯度均能达到后期分子检测要求。说明本方法提取的DNA适用于在分子水平上检测化妆品的动物源性成分。 　　关键词：化妆品；动物源性；基因组DNA；提取方法 　　中图分类号：S188文献标识号：A文章编号：1001-4942（2016）09-0131-05 　　AbstractIn order to achieve the purpose of detecting animal origin of cosmetics at the molecular level， a method for extracting genomic DNA of animal origin from cosmetics was established. The Chelex-100 and Glass-milk were used to extract genomic DNA from cosmetics. This method had advantages of less pollution， easy to operate， fast and high efficient. Then， the quality of genomic DNA was detected by UV spectrophotometer， PCR and DNA sequencing. The results showed that the concentration and purity of DNA both met the requirements of later molecular experiment. It indicated that the DNA exacted by this method was suitable for the detection of animal origin of cosmetics at the molecular level. 　　KeywordsCosmetics； Animal origin； Genomic DNA； Extraction method 　　近年来具有美容护肤功效的马油、马奶和驴奶等被广泛应用于化妆品中，且此类化妆品倍受亚洲女性青睐。马油的应用在我国历史悠久，《名医别录》中记载马脂肪具有生发护发作用，《本草纲目》中记载马脂肪味甘、平、生发。马油易被皮肤吸收且有美白作用，另外还有加速皮肤新陈代谢、增强细胞活力、抗皮肤衰老等功效[1]。马奶被阿拉伯人视为“阿拉所赐的神药”，欧洲贵妇人使用马奶沐浴以保持皮肤光滑、美丽，马奶洗面奶不仅能防止皮肤老化，还有消除皱纹的神奇功效[2]。驴奶中的VA、VE、VC和B族维生素抗氧化、抗衰老，可阻止细胞内不饱和脂肪酸氧化分解，阻止皮肤干燥和角质化，其中所含的芋碱酸可以使皮肤细白、柔嫩光滑、有弹性[3]。 　　由于马油、马奶和驴奶具有很好的美容功效，所以近年来马油、马奶和驴奶制品的价格均高于普通的牛奶制品，市场需求不断扩大，在经济利益的驱使下，部分没有驴、马资源的化妆品厂家用牛奶冒充驴奶和马奶，甚至有的厂家的马奶、驴奶化妆品中不含有任何动物源性成分，严重危害了消费者的健康和利益。 　　目前我国对化妆品中动物源性成分的检测还比较薄弱。从分子水平上检测化妆品中的动物源性成分是最准确有效的方法，而该方法首先需从化妆品中提取基因组DNA。由于化妆品特殊的加工工艺及所含成分复杂，其中的DNA成分已受到严重的破坏，这给DNA的提取带来很大困难。本研究旨在建立一种能简单、快速、高效地从化妆品中提取动物源性基因组DNA的方法，为化妆品中动物源性成分的检测奠定基础。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　市售不同品牌的马和驴动物源性油膏、面膜、面霜、乳液和洗面奶等化妆品共20份。 　　1.2试剂与设备 　　Chelex-100为Sigma公司产品；Glass Milk为Thermo产品；DNA分子量Marker DL2000、TaKaRa PCR仪、电泳上样缓冲液等购自宝生物工程（大连）有限公司；蛋白酶K购自生工（上海）有限公司；5424D型高速离心机，Eppendorf公司；凝胶成像仪，BIO-RAD公司。 　　1.3化妆品中动物源性DNA的提取 　　取液体状（200 μL）、膏状