两种猪伪狂犬病gB抗体检测方法对比试验.docVIP

两种猪伪狂犬病gB抗体检测方法对比试验.doc

  1. 1、本文档共4页,可阅读全部内容。
  2. 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  5. 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  6. 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  7. 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  8. 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
两种猪伪狂犬病gB抗体检测方法对比试验.doc

两种猪伪狂犬病gB抗体检测方法对比试验   [中图分类号]S858.28 [文献标识码]B [文章编号]1003―1650 Q016)03―0248―01   猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由猪伪狂犬病病毒(Pseudotabies virus,PRV)引起的一种高度接触性传染病。猪是本病的主要宿主和传染源,健康猪与病猪、带毒猪直接接触可感染本病。通常引起妊娠母猪流产、木乃伊胎、死胎和产弱仔;初生仔猪出现神经症状,感染率和死亡率可达100%,成年猪感染后多耐过,不发病呈隐性感染,造成长期带毒排毒,成为最危险的传染源,严重影响种猪场生产。本病广泛分布于世界各地,已有50多个国家和地区报道该病的流行,给养猪业构成很大威胁。我国自1947年首次报道该病以来,随着养猪业集约化规模化的发展,已有20多个省市报道发生了该病,并在许多种猪场呈暴发流行趋势,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。伪狂犬病病毒属于疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科猪疤疹病毒Ⅰ型(Suid Herpesvirus Ⅰ,SHV-Ⅰ),病毒粒子呈圆形或椭圆形外观,核衣壳含病毒基因组DNA和核衣壳蛋白,核衣壳外被一层非晶体状蛋白样结构(tegument)所包裹,病毒粒子最外层是病毒囊膜(envobpe),它是由宿主细胞膜结构衍生而来的脂质双层结构,囊膜上镶嵌有病毒编码的囊膜蛋白,大多是糖蛋白。α-疱疹病毒中至今已鉴定的糖蛋白有gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN,除gG外其余都是病毒粒子结构成分。目前已对PRV的多种糖蛋白进行了结构和功能的研究,糖蛋白gB是猪伪狂犬病病毒的一种主要糖蛋白,能诱导机体产生中和抗体,是PR V免疫抗体评价的首先蛋白。   1材料和方法   1.1材料   1.1.1仪器酶标仪M 550型,购自Bio-R ad公司:洗板机ELx50型,购自B io-Tek公司。   1.1.2试剂盒PRV gB-I-E L ISA试剂由河南省农业科学院动物免疫学重点实验室提供,主要成分包括抗原包被E LISA板2块,抗体稀释液1瓶,辣根过氧化物酶标记的养抗猪IgG 1支,底物A液和B液各1瓶,终止液1瓶;爱德士PRV-gB ELISA试剂盒为美国美国ID EXX公司产品。   1.2方法   1.2.1 PRV gB-I-ELISA 操作程序按常规间接E LISA方法进行。结果判定:按方法说明书中,阴、阳性血清效价的临界值为0.3,根据标准阳性和阴性对照血清和检测样品的0 D450nm吸光值计算被检样品的效价,血清样本抗体效价=(样品的0 D450nm值-阴性对照的0 D450nm值)/(阳性对照的0 D450nm值-阴性对照的0 D450nm值)计算每一份血清效价。当效价≥3.0时判为阳性,效价0.3时判为阴性。   2结果与分析   2.1 PRV感染血清检测结果   PRV感染猪血清检测结果见表1。检测350份PRV感染猪血清,ID EXX PRV-gB EL ISA和PRV gB-I-ELISA检测均为阳性的血清319头份,均为阴性的有12头份,二者检测结果不一致的有19头份,符合率为94.6%(331/350)。   2.2 PR V免疫血清检测结果   PRV免疫猪血清检测结果见表2。共检测420头份,其中,ID EXX PRV-gB E LISA和PRV gB-I-ELISA检测均为阳性的血清362头份,均为阴性的有23头份,二者检测结果不一致的有35头份,符合率为91.6%(385/420)。   根据两种不同背景的猪血清,用两种ELISA方法检测,总符合率为92.6%(792/855),说明两种方法检测结果基本一致,所建立的PRV gB-I-ELISA方法具有较好的特异性和敏感性,可以用于评价猪PRV gB抗体。   3讨论   疫苗免疫我国控制PRV的主要措施,因此检测血清抗体效价,评估免疫抗体水平至关重要。常用的PRV免疫抗体检测方法主要有中和实验(SNT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、乳胶凝集试验(LAT)等,其中,ELISA被列为国际贸易种PRV抗体检测的指定方法。本研究团队利用PRV gB蛋白抗原富集区为诊断抗原,成功建立了PRV gB抗体间接ELISA方法(gB-I-ELISA),为进一步评价该ELISA方法的性能,本研究通过检测PRV感染血清、免疫血清和临床血清样品,通过与商品化的爱德士PRV gB抗体ELISA试剂盒对比,所研制EL ISA方法的特异性和敏感性,二者的符合率为92.6%,可以用于评价猪PRY gB抗体,为PRY免疫抗体监测、母源抗体评估以及免疫程序制定提供参考依据。 3

文档评论(0)

yingzhiguo + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

版权声明书
用户编号:5243141323000000

1亿VIP精品文档

相关文档