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人工诱导紫穗槐多倍体条件优化研究 　　摘要 多倍体育种就是利用人工手段使作物的染色体数目加倍，用秋水仙素对植物进行多倍体诱导是人工诱导加倍的方法之一。为了探究紫穗槐多倍体诱导的最优条件，选取秋水仙素浓度、胚根长度、温度以及处理时间4个因素，用棉花蘸取秋水仙素包裹根尖诱导多倍体的发生，并对其进行形态学和细胞学的观察分析。结果表明：秋水仙素浓度0.07%，胚根长度2 mm，温度37 °C，处理时间48 h，诱导率最高。 　　关键词 紫穗槐；秋水仙素；多倍体；人工诱导 　　中图分类号 S792.26 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）11-0191-01 　　Abstract Polypoidy breeding is to double the number of chromosomes artificially.One of the methods for the polypoidy induction is to use colchicine.Concentration of colchicine，length of protruded radicle，temperature and time were selected as the influencing factors to induce polypoidy of Amorpha fruticosa L.The radicle tips were covered by cotton filled with colchicine to induce polypoidy.The morphology and cytology were observerd and analysed.The orthogonal test showed the result of optimal conditions for polypoidy induction being colchicine concentration 0.07%，radicle length less than 2 mm，temerature 37 ℃，and time 48 h，with which the induction rate ranked the highest. 　　Key words Amorpha fruticosa L.；colchicine；polypoidy；artificial induction 　　紫穗槐（Amorpha fruticosa L.），别名棉槐，为豆科紫穗槐属落叶丛生灌木，耐寒、耐旱、耐湿、耐盐碱、抗逆性极强，对土壤环境要求不高，具有改良盐碱地、改善土壤结构、提高土壤肥力、保持水土的功能，是一种优良的水土保持林种[1]。 　　多倍体育种就是利用人工的手段使作物的染色体数目发生加倍，可提高作物的产量和品质，在树木方面还可培育速生用材以及优良饲料品种。人工诱导多倍体的方法有物理方法和化学方法，物理方法包括射线、高温处理、异常温度和调整离心力；化学方法中常用的化学诱导剂有秋水仙素、异生长素、萘骈乙烷、氧化亚氮等。在上述多种诱导剂中，以秋水仙素诱导效果最好、效率最高[2]。试验拟用正交设计的方法，使用秋水仙素对紫穗槐根尖进行不同方式的处理，以期找到最佳的秋水仙素诱导紫穗槐根尖染色体数目加倍的方案。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　选用2015年北京市购进的紫穗槐种子500 粒，种子坚硬，粒径均匀，硬粒饱满，1 kg种子有8万～9万粒，一般发芽率为60%～70%。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 种子萌发。取500粒紫穗槐种子（除去破损、弱小、死亡的），于60 ℃ 温水中浸泡0.5 h后剥去果荚[3]，将种子置于铺有2层纱布的培养皿中，上盖2层纱布，加水润湿，放入4 ℃ 冰箱内1 d。从冰箱取出，放入全日光25 ℃恒温培养箱，及时添水，培养至超过50%的种子萌发。 　　1.2.2 诱导条件。选取秋水仙素浓度、胚根长度、处理时长和温度4个因素。4个因素的水平分别为：秋水仙素浓度0.05%、0.07%、0.10%[4]；胚根长度4 mm[2]；处理时长24、36、48 h；温度条件4、25、37 ℃ 。采用正交设计L9（34）进行试验。每组约30 粒紫穗槐种子，加上对照组（CK），共计10组试验。按照正交试验设计作不同处理。放在无光照条件培养进行膨大试验，计算诱导率，计算公式如下： 　　诱导率（%）=多倍体植株数/萌发总植株数×100 　　将已萌发的种子按照试验长度分类，放入带有2层纱布的培养皿中，每个培养皿中10粒，间距适中，用一小团棉花蘸取秋水仙素包裹根尖，分别放入相应温度培养24、36、48 h。对照组（