第三章 药物的杂质检查选读.ppt

为保证薄层系统符合要求，中国药典2005增加了系统适用性试验： ⑴检测灵敏度：指杂质检查时，采用对照溶液稀释若干倍的溶液与供试品溶液和对照品溶液在规定色谱条件下，在同一薄层板上点样、展开、检视，前者应显示清晰的斑点。 ⑵比移值：可用比移值说明主斑点或杂质斑点的位置。 ⑶分离效能：杂质对照品用供试品自身稀释对照溶液或同品种对照溶液溶解制成混合对照溶液的色谱图中，显示两个清晰分离的斑点。 ㈡ 高效液相色谱法 1. 内标加校正因子测定法：用于有对照品的杂质、能够测定杂质校正因子的情况。 先进样加有内标物的对照品溶液，测定杂质校正因子 方法 再进样加有内标物的供试品溶液，求杂质浓度 2. 外标测定法：用于有对照品的杂质，且进样量可精确控制的情况。 方法 配制杂质对照品溶液和供试品溶液，分别取一定量注入色谱仪，测定对照品和供试品中杂质的峰面积，按外标法计算杂质的含量。 3.加校正因子的主成分自身对照法 方法 在方法建立时，采用杂质对照品和药物对照品配置一定浓度的溶液，进行色谱分离、分析后，按下式计算所得: 进行杂质检查时，可不用杂质对照品。但是建立方法时，需要利用杂质对照品。 测定杂质含量时，将供试品溶液稀释成与杂质限度相当浓度的溶液，作为对照溶液调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰高约达满量程的10%-25%， 分别取供试品溶液和对照品溶液进样，测量供试品溶液色谱图上各杂质峰面积，将这些峰面积分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，依法计算各杂质的含量。 4. 不加校正因子的主成分自身对照法：用于单一杂质含量较少、无法得到杂质对照品因而无法获得校正因子、杂质结构与主药结构相似,其响应因子差别不会太大的情况下。 ①按规定，将供试品溶液稀释成与杂质限度相当的浓度，作为对照溶液。 ②分别取供试品溶液和对照品溶液进样，计算供试品溶液色谱图上各杂质峰面积及其总和，与对照溶液主成分峰面积比较，以确定杂质是否超过限量。 例：氧氟沙星中有关物质的检查。 方法 方法：取供试品溶液适量，进样，经高效液相色谱分离、测定后，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不得超过限量。 5. 峰面积归一法：粗略考察供试品中杂质。 在杂质与主成分结构差异较大时,存在测量误差大缺陷，不宜于”微量杂质”检查。 主峰 杂质1 杂质2 杂质3 溶剂峰 ㈢气相色谱法 如：氯贝丁酯中对氯酚和挥发性杂质的检查 与高效液相色谱法相同的有内标法加校正因子测定法、外标法和峰面积归一法测定法，不同的有标准加入法。 该法是将一定量杂质对照品溶液精密加入到供试品溶液中，据内标法或外标法测定杂质的含量，再扣除加入的对照品溶液含量，即得供试品溶液中杂质含量。 除药物中残留溶剂外，一些挥发性特殊杂质也可采用气相色谱法检查。 二、光谱分析法 ㈠ 紫外分光光度法：当杂质在某一波长处有最大吸收，而药物在此无吸收时，可通过控制供试品溶液在此波长处的吸收度来控制杂质的量。 如：地蒽酚中二羟基蒽醌的检查。二羟基蒽醌三氯甲烷溶液在432nm处有最大吸收，而地蒽酚在此处无吸收，因此，中国药典规定：0.01%地蒽酚三氯甲烷溶液在432nm处吸收度不超过0.12。 ㈡ 红外分光光度法 原理：某些多晶型药物由于其晶型结构不同，一些化学键的键长、键角发生不同程度的变化，从而导致红外光谱中某些特征峰的频率、峰型和强度出现显著不同。 如：甲苯咪唑中A晶型的检查。 用于药物中无效或低效晶型的检查 640cm-1：A晶型有强吸收，C晶型吸收很弱 662cm-1：A晶型吸收很弱，C晶型却有较强吸收 依据： 当供试品中含有A晶型时，在上述二波数处的吸收度比值将发生改变。 ㈢ 原子吸收分光光谱法 ①取供试品，按规定配制成供试品溶液，另取等量的供试品，加入限度量的待测元素溶液，按相同方法制备，得对照溶液。 ②先测定对照溶液，调节仪器使具有合适的读数a，在相同条件下测定供试品溶液，记录其读数b。 ③若b ?（a-b），说明供试品中所含杂质元素符合规定；若b ?（a-b）时，供试品中所含杂质元素超过限量。 例：维生素C中铁盐及铜盐检查。 通常采用标准加入法控制金属杂质的限量 三、化学分析法 根据杂质与化学试剂在一定条件 下发生化学反应产生的现象进行检查 颜色 沉淀 气体 不得产生颜色 不得超过杂质对照品颜色 吸收度不得超过一定值 不得产生沉淀 不得产生气泡 四、物理分析法 1. 杂质与药物存在臭味及挥发性差异 臭味：药物中存在具有特殊气味的杂质，可以由气味判断该杂质的存在。 如：黄凡士林中异性有机物检查 ? 灼烧时有异味。 挥发性：将药物挥干，残渣于105?C烘干至恒重，称